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切割质粒和目的基因
高中生物,
切割目的基因
和
切割质粒
要分别注意什么,以及分别所具备的原...
答:
1、目的基因的切割:①选取的限制酶,其识别序列不可出现在目的基因内部,否则会破坏目的基因。②为了避免目的基因自身环化(目的基因的两端被连接成环),一般
切割目的基因
时选取目的基因两侧产生不同末端的限制酶。2、
质粒
的切割 ①选取限制酶,要和切割目的基因的保持一致。要注意切割位点不可破坏所有标记...
...常用两种不同的限制酶
切割目的基因
和
质粒
,获得不同的粘性末端,其主...
答:
(1)用限制酶切割DNA后,可能产生黏性末端,也可能产生平口末端.若要在限制酶基因工程中,往往采用同种限制酶
切割目的基因和质粒
以产生相同的黏性末端,再用DNA连接酶使其直接进行连接.(2)RNA聚合酶识别和结合的部位是启动子.将目的基因导 ...
质粒
或
目的基因
什么时候用同一种酶,什么时候用两种?
答:
单酶切:如果用同一种限制酶
切割质粒和目的基因
,会产生四个相同的黏性末端,那么可能会出现四个结果。(1)质粒和质粒连接(2)质粒和目的基因连接(3)目的基因和目的基因连接(4)质粒和目的基因环化。因此为了防止出现上面的情况,会采用双酶切。双酶切就是用两种酶切割目的基因和质粒,这样质粒和目...
高二生物 基因工程
目的基因
和
质粒
是否要用同一限制酶进行
切割
?_百度...
答:
目的基因
和
质粒
要[同时]用同一种限制性核酸内切酶
切割
,不然就没法连了。但最好用不同的限制酶切两端(切目的基因是不是应该切两下么),防止载体自连或目的基因自连。啊啊,这道题。这题是这样的,你仔细看一下质粒,若用酶2切,那质粒两处酶切位点都要断,所以质粒只能用酶1切,保证其只有...
基因工程中,为什么
切质粒和
切
目的基因
要
答:
基因
工程中,为什么
切质粒和切目的基因
要 使用方法同种酶,为了使
质粒和目的基因
的切口形成相同(或者说互补也可以)的碱基序列,才能让目的基因嵌入质粒中
在基因表达构建载体中什么
切割质粒
什么切割
目的基因
,为什么?
答:
质粒
是一个闭合的DNA圆圈,你得先切开它,把它切成一条线;然后你再从一长串DNA上切下你要的目的片段,用连接酶像胶水一样,吧质粒的两端
和目的
片段的两端连接起来——又成一个圆圈了,但是这次这个DNA圆圈已经含有你要的片段了.由于载体质粒只有圆圈状才有活性,才有用,所以你必须这么做.
在基因表达构建载体中什么
切割质粒
什么切割
目的基因
,为什么?
答:
质粒
是一个闭合的DNA圆圈,你得先切开它,把它切成一条线;然后你再从一长串DNA上切下你要的目的片段,用连接酶像胶水一样,吧质粒的两端
和目的
片段的两端连接起来——又成一个圆圈了,但是这次这个DNA圆圈已经含有你要的片段了。由于载体质粒只有圆圈状才有活性,才有用,所以你必须这么做。。。
如何使
目的基因与质粒
结合形成重组质粒?
答:
先用同一种限制性核酸内切酶
切割目的基因
和
质粒
,露出相对应的粘性末端,再用DNA连接酶使两者的粘性末端结合形成重组质粒。质粒是目的基因的运载体,在用鸟枪法或人工合成法提取目的基因后,用限制性内切酶将质粒切开,使目的基因与切开的质粒具有相同的粘性末端。它们的碱基恰好配对,氢键自动结合,再用DNA...
剪切
目的基因
所用的限制酶与
切割质粒
所用限制酶一定要相同吗
答:
一定要相同。只有用同一种限制酶剪切
目的基因
和
切割质粒
,才能暴露相同的黏性末端或平末端,便于DNA连接酶的拼接
生物问题:关于
基因
工程?
答:
会出现目的基因环化(首尾连接),这不利于目的基因和运载体质粒结合。如果你用限制酶1和限制酶2切割含有目的基因的DNA后,为了能让目的基因和质粒结合,你应该用同种限制酶
切割质粒
,也就是也用限制酶1和限制酶2切割质粒,这样
质粒和目的基因
就会有相同的末端,可以定向连接,不会出现环化的问题。
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