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细胞周期检测为什么要固定
细胞周期
中限制点和
检测
点?
答:
细胞周期检验点 细胞周期检验点(checkpoint)是细胞周期调控的一种机制,
主要是确保周期每一时相事件有序、全部完成并与外界环境因素相联系
。 G1/S检验点:在酵母中称start点,在哺乳动物中称R点(restriction point),控制细胞由静止状态的G1进入DNA合成期,相关的事件包括:DNA是否损伤?细胞外环境是否适宜...
观察大蒜根尖分生组织
细胞周期为什么要
先用秋水仙素处理一下,再
固定
...
答:
秋水仙素处理是
为了杀死细胞,是细胞的分裂时期固定
求
细胞周期检测
方法:PI法操作步骤
答:
1. 细胞培养:取对数生长期的细胞,按1×106cells/ mL以1mL接种24孔板或2mL接种于6孔板内,进行所需的处理(比如加入药物),特定时间后终止培养,进行下一步的实验。2.
细胞固定
: 800rpm离心5min,收集细胞沉淀,弃上清,用预冷PBS洗涤两次,加入预冷75%乙醇,于4℃固定4h以上。3. 细胞染色:1...
流式细胞仪
检测
可以提前将
细胞固定
吗
答:
加的量根据你细胞的多少.你这个涉及的测蛋白,那么加多聚甲醛的量和时间可能 要控制得严一些才能保证最低限度不破坏a-SMA的结构.如果单测细胞凋亡和周期的话
固定
液多一点和固定时间长一点都影响不是太大.\x0d其实无论是做
细胞周期
的乙醇固定,...
怎么分析pi staining
细胞周期
答:
1、细胞浓度一定要≧1×106/ml,特别是阴性对照管细胞量要大一些,以便样品电压调节;2、必须保证被
检测
样品为单细胞悬液;3、如果样品细胞为培养的贴壁细胞,将上清转入离心管(其中含有脱落的凋亡细胞),与不含EDTA的胰酶消化的细胞合并后离心收集细胞;4、在
细胞固定
时一定要将细胞吹开,吹成单细胞...
流式细胞仪观察
细胞周期
样品怎样准备
答:
根据你所购买的试剂盒而定,一般是先用70%乙醇先
固定
,然后加RNA酶和PI,半个小时左右上机
检测
就可以了.
需要
注意的就是加酒精固定的时候要用四度预冷的酒精,缓慢的加,边加边晃动
细胞
,避免细胞黏连在一起.(1)细胞培养 取对数生长期的细胞,按1X106个/mL以1mL体积接种于6孔板内。培养24h后,加入...
利兰·哈特韦尔的科研
答:
哈特韦尔对细胞周期研究的重要贡献表现在两个方面:一是发现了大量控制细胞周期的基因,特别是“起点”基因的发现,使人们知道该基因在控制每个细胞循环过程中的第一步起着关键的作用;二是
细胞周期检测
点的发现,它对细胞在周期运转过程中,保证细胞正常生长和分裂起着至关重要的作用。这两大发现对于全面地了解细胞的生长...
Annexin Ⅴ-FITC/PI能否用于
测定细胞周期
答:
测
细胞周期
的大致步骤如下:1. 收集1 x106个细胞,1500rpm离心5 min,弃上清。同样离心条件下,用4℃预冷的PBS洗细胞两次。2. 完全去除上清,加入-20℃预冷的70%乙醇1 ml,立即充分混匀,于4℃
固定
过夜或-20℃长期固定(可保存数周)。3. 细胞染色 1500rpm离心5 min,弃上清,以1...
核定位的蛋白做免疫荧光
需要
dapi染色么
答:
1.实验原理 免疫染色的实验原理类似于Western Blotting,两者都是运用抗体的特异性识别作用来显示目的蛋白,但是由于免疫染色
需要
在原位进行,而且蛋白没有经过富集,因此其实验难度较高。实验的基本原理是:利用固定剂(通常是甲醛或多聚甲醛)将
细胞固定
,使得细胞膜的通透性大大增加,并且利用Triton-X-100...
生物化学实验中,如何进行
细胞周期
的
检测
呢?有
什么
方法么,谢谢回答...
答:
主要操作步骤如下:①组织块用0.25%胰酶消化30min~1h。②200~400目筛网过滤细胞,获得单细胞悬液。③75%乙醇(-20℃预冷)
固定细胞
1h。④加入PI(终浓度50g/mL)和无DNA酶污染的RNA酶(终浓度50g/mL)1mL染色30min~1h。⑤流式细胞仪
检测细胞周期
和凋亡 ...
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