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聚丙烯酰胺凝胶化反应
聚丙烯酰胺凝胶
出峰顺序
答:
1、首先将
聚丙烯酰胺
加入适量水溶解,制成浓度约为0.1m g/ml的
凝胶
液。2、其次电泳槽的准备及预试,去离子水冲洗干净后,在不锈钢板上涂上一层薄层丙酮或乙醚(没有这两种物质也可不涂),然后均匀地滴上一定量的胶体溶液(约10 ml/g)。3、最后电泳时间的选择以30~40 min为宜。
聚丙烯酰胺凝胶
电泳原理
答:
3、聚合时丙烯酰胺分子通过加成反应形成长链,双体的作用是在长链之间形成交联,成为具有三维网状结构的凝胶
。所以在凝胶电泳中除了具有电泳的分离外还具有分子筛作用,从而增高了它的分辨能力。4、聚合时,根据分离的需要,可以用改变单体溶液浓度或增减双体比例的办法制成孔度大小不同的凝胶。在分离血清蛋白...
聚丙烯酰胺凝胶
是如何聚合?
答:
过硫酸铵就是引发剂,而TEMED可以催化过硫酸铵产生自由基,从而加速丙烯酰胺凝胶的聚合。聚丙烯胺凝胶由单体丙烯酰腋甲叉双丙烯酰胺聚合而成,催化聚合的常用方法有两种: 化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过硫酸铵(AP)为催化剂,以四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂。
聚丙烯酰胺凝胶
电泳简称PAGE ,是以聚丙烯...
聚丙烯酰胺凝胶
聚合的影响因素?
答:
3、温度:温度高聚合快,
但高浓度凝胶聚合时易产生小气泡
,低温(5℃)聚合凝胶会变得脆而混浊,一般25-35℃聚合较好。
聚丙烯酰胺凝胶
电泳过程中存在放大效应
答:
首先,
聚丙烯酰胺凝胶具有分子筛效应
。当生物分子通过凝胶孔洞时,大分子和多电荷分子会被限制在凝胶孔洞中,而小分子和单电荷分子则可以通过凝胶孔洞。这种分子筛效应使得不同大小的分子在凝胶中的迁移率差异更加明显,从而实现更有效的分离。其次,聚丙烯酰胺凝胶还具有电荷效应。在聚丙烯酰胺凝胶中,由于凝胶...
聚丙烯酰胺凝胶
电泳和琼脂糖凝胶电泳载体凝固条件
答:
1、
聚丙烯酰胺凝胶
的凝结是化学过程,其中的丙烯酰胺单体通过化学
反应
聚合成高聚物,化学反应的特点就是温度越高,反应速度越快。2、琼脂糖凝胶凝结是物理过程,其中的琼脂糖长链在整个过程中没有变化,有所变化的是氢键等次级键的结合情况.温度越低,氢键结合越牢固。
简述
聚丙烯酰胺凝胶
聚合的原理及如何调节凝胶的孔径
答:
聚丙烯酰胺凝胶
电泳是以聚丙烯酰胺凝胶为载体的一种区带电泳。该凝胶由丙烯酰胺(Acr)和交联剂N,N—甲叉双丙烯聚酰胺(Bis)聚合而成。聚丙烯酰胺凝胶电泳利用电泳和分子筛的双重作用分离物质。 Acr和Bis单独存在或混合在一起时是稳定的,但在具有自由基团体系时就能聚合。引发自由基团的方法有化学法...
聚丙烯酰胺凝胶
电泳为什么那凝胶根本就不凝呢?
答:
聚丙烯酰胺
聚合
反应
可受下列因素影响: 1、大气中氧能淬灭自由基,使聚合反应终止,所以在聚合过程中要使反应液与空气 隔绝。 2、某些材料如有机玻璃,能抑制聚合反应。 3、某些化学药物可以减慢反应速度,如赤血盐。 4、温度高聚合快,温度低聚合慢。 以上几点在制备
凝胶
时必须加以注意。
试述
聚丙烯酰胺凝胶
电泳原理。
答:
利用
聚丙烯酰胺凝胶
作电泳的支持物来分离蛋白质、核酸等大分子化合物的聚丙烯酰胺凝胶电泳法。聚丙烯酰胺单体(Acr)与交联剂甲叉双丙烯酰胺(Bis)在催化剂过硫酸铵或维生素B2作用下聚合交联而形成三维网状结构凝胶。在催化过程中同时加入四甲基乙二胺作为加速剂。聚丙烯酰胺凝胶不但可以作为电泳支持物,同时具有...
引起
聚丙烯酰胺凝胶
未聚合的三点原因
答:
例如,在pH 8.8条件下7%的
丙烯酰胺
溶液30分钟就能聚合完毕;在 pH 4.3时聚合很慢,要90分钟才能完成。温度与聚合的快慢成正比。通常在室温下就很快聚合,温度升高聚合更快。如将混合后的
凝胶
溶液放在近0℃的地方,就能延缓聚合。一般来讲,温度过低,有氧分子或不纯物质存在时都能延缓凝胶的聚合。...
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