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配胶浓度选择
western blot
胶浓度
的
选择
答:
western
blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样
,比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为western blot的膜应该是完全覆盖SDS PAGE的凝胶,所以不用太担心条带在凝胶上位置偏上活偏下 所以weste...
分子量小用多少
浓度
的
胶
答:
分子量小用30到50KD浓度的胶
。胶浓度要配制的稀一些,一般选择3%到10%的凝胶增加转膜时间,分子量较大的蛋白要完全转到膜上需要更长的时间。在不同浓度的胶中的速度差要尽可能达到最大,假设是对数正态分布,那么方差要足够大,才会有较好的分离效果,另一方面,蛋白跑的路程越大,也越能和附近的蛋...
10000bp用多少
浓度
的
胶
答:
1.25%。琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离蛋白质和寡核苷酸的方法。不同浓度的琼脂糖凝胶可用于分离不同大小的目标分子,100-200bp的片段在0.8%-1%的
胶浓度
下即可分离,1000-2000bp的片段需在1%-1.2%的胶浓度下分离。
蛋白分子量43kD,
配胶浓度
答:
12%
。根据目的蛋白的分子量大小选择不同浓度的分离胶,8%、12%和15%三种浓度的分离胶就完全可以搞定日常蛋白的测定。一般测定100kDa分子量以上的蛋白可选择8%浓度的分离胶。测定20kDa分子量以下的蛋白可选择15%浓度的分离胶,中间的分子量可选用12%浓度的分离胶。
浓度
多少跑
胶
能看出来
答:
百分之2
。根据查询丁香实验网显示,胶的浓度越低,内部孔径越大,对大片段的分辨率会更好,浓度在百分之2最好。
随机引物的跑
胶浓度
答:
一般为10μM。随机引物的跑
胶浓度
应该根据实验要求
选择
,10μM是一般的起始浓度,需要根据反应物的浓度和特异性进行调整。过高的浓度会导致引物与非特异性区域结合,影响PCR扩增效率。
200bp片段用多少
浓度
的
胶
答:
看多大片段。1、一般来说1%是够用了。2、但如果50-200BP的话,用1.5%,2%的吧,1KB以上的可以用0.8%甚至更低
浓度
的
胶
。
western blot中的分离
胶
的
浓度
怎么
选择
?
答:
western-blot中分离
胶浓度
的
选择
取决于目的蛋白分子量。不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白。而因为western blot的膜应该是完全覆盖SDS PAGE的凝胶,所以不用太担心条带在凝胶上位置偏上活偏下。所以...
22kd用什么
浓度
的
胶
答:
12%的
胶浓度
。22kd因为电泳的电压太高所以用12%的胶浓度即可,浓度是以1升溶液中所含溶质的摩尔数表示的浓度。
如何
选择
琼脂糖凝胶的
浓度
来分离DNA
答:
凝
胶浓度
(%) 线性DNA长度(bp)0.5 1000~30000 0.7 800~12000 1.0 500~10000 1.2 400~7000 1.5 200~3000 2.0 50~2000
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