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酵母同源重组
酵母
交配型转变属于
答:
同源重组
。根据中国生物网资料,
酵母
交配型简述酵母菌交配方式。孢子与孢子、单倍体细胞与孢子、细胞间,是同源的重新组合。酵母交配型是发酵中最常用的生物种类,细胞为球形或者卵形。
DNA
同源重组
的问题
答:
日本理化研究所日前发表新闻公报说,该所研究人员发现
酵母
线粒体中的DNA(脱氧核糖核酸)在一定条件下进行
同源重组
时,不像以前认为的那样需要DNA形成超螺旋。这一发现将为抗衰老等方面的生物医学研究提供新线索。新闻公报说,记录生命遗传信息的DNA呈稳定的双链螺旋结构,但在复制、转录和重组等过程中,DNA...
同源重组
敲除如何验证
答:
同源重组
敲除的验证主要包括以下步骤:选择拟敲除基因的上下游约500~1000 bp片段作为同源臂,将同源臂克隆到携带筛选标记基因的质粒载体中。选择合适的限制性内切酶切割载体,引入双链断裂。将线性化的DNA片段通过转化导入目标细胞。转入细胞的外源DNA片段被细胞内DSB(double strand DNA break)识别因子识别,...
毕赤
酵母
的优缺点
答:
Pichia.pastoris
酵母
菌体内无天然质粒,所以表达载体需与宿主染色体发生
同源重组
,将外源基因表达框架整合于染色体中以实现外源基因的表达。包括启动子、外源基因克隆位点、终止序列、筛选标记等。表达载体都是穿梭质粒,先在大肠杆菌复制扩增,然后被导入宿主酵母细胞。为使产物分泌胞外,表达载体还需带有信号肽...
端粒与端粒酶是如何发现的?
答:
1.2端粒延长机制与端粒酶的发现 在1984年报道
酵母
端粒序列的同一篇文章中.Elizabeth H.Blackburn还发现,不论是四膜虫还是酵母自身的端粒序 列都可以在酵母中被保护和延伸。而带着四膜虫端粒的DNA 人T染色进入酵母后。其末端会被加上酵母的而非四膜虫的 端粒重复序列【13I。此后,
同源重组
、转座元件、...
酵母
双杂交文库构建和筛选-宝吉生物
答:
1.我们是采用
同源重组
的方法构建文库,没有经过任何的内切酶切割和连接过程,确保不会出现基因被酶切切断的情况,能够保证基因的完整性,而Clonetech的是用酶切连接的方式构建的。 2.由于我们采用的是重组的方式把cDNA重组到载体上,相对clonetech的SMART的T4连接酶的方法效率要高的多,我们承诺原始库的库容量在1*10^7以...
巴斯德毕赤
酵母
表达系统的巴斯德毕赤酵母的载体
答:
)为了获得高稳定的外源蛋白表达菌株,巴斯德毕赤
酵母
表达载体连同外源基因通过
同源重组
整合至宿主染色体基因组座位上。与自主复制的质粒型表达载体不同,整合型表达载体的拷贝数可以有很大的变化。含多拷贝外源基因的表达菌株合成蛋白的量也较多。多拷贝表达菌株的获得方式有两种。一种是利用SDS-PAGE电泳、免疫...
pPIC9K转化
酵母
时为什么要线性化,不同的酶切位点的产生的线性化的酵母...
答:
线性化方便目的基因的插入重组,我们一般在Sal1位点线性化,否则不能通过
同源重组
整合到
酵母
的基因组上。一般来说,选SacⅠ线性化整合,重组率要高一些 不同的酶切位点的产生的线性化的酵母的表性如下 重组质粒βhCG-pPIC9K的构建及嗜甲醇酵母(Pichia pastoris)的转化 目的:为用基因重组技术表达hCG避孕疫苗抗原,构建在...
什么是Meselson Radding
重组
模型?
答:
Meselson-Radding模型首次将DNA合成与重组联系起来,这种DNA杂合链形成机制似乎更贴切地解释了非对称重组现象〔1〕。1.3 双链断裂修复模型 在
酵母
系统的重组研究中,发现载体DNA双链断裂可大大提高
同源重组
的效率,Holliday和Meselson-Radding模型都不能很好地解释这一现象。基于这一发现,Szostak 等提出了双链断裂修复(D...
酵母
整合表达一般整合在什么位置
答:
图1为一个典型的巴斯德毕赤
酵母
表达载体。该载体包含醇氧化酶—1(AOX1)基因的启动子和转录终止子(5’AOX1和3’AOX1),它们被多克隆位点(MCS)分开,外源基因可以在此插入。此载体还包含组氨醇脱氢酶基因(HIS4)选择标记及3’AOX1区。当整合型载体转化受体时,它的5’AOX1和3’AOX1能与染色体上的
同源
基因
重组
...
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