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T4和T7DNA聚合酶的差异
DNA聚合酶的
举例
答:
DNA聚合酶
Ⅲ是细胞内DNA复制所必需的酶,缺乏该
酶的
温度突变株在限制温度(non permissive temperature)内是不能生长的,此种突变株的裂解液也不能合DNA,但加入DNA聚合酶Ⅲ则可以恢复其合成DNA的能力。DNA聚合酶Ⅲ的组成亚基 分子量(×103) 其它名称a 140 dnaE蛋白,polC蛋白ε 25θ 10τ 83γ 52 dnaZ蛋白δ 3...
什么是
T7
噬菌体
DNA聚合酶
?
答:
T7
噬菌体DNA聚合酶是所有DNA聚合酶中持续合成DNA能力最强的一个,在DNA测序时有优势,它的聚合活性功能
与T4
噬菌体DNA聚合酶和Klenow:DNA聚合酶类似,但3′→5′外切活性更强,为Klenow的1000倍,T7噬菌体DNA聚合酶可替代
T4DNA聚合酶的
聚合功能并可用于长模板的引物延伸。
关于PCR,你知道多少?(三)---Taq
DNA聚合酶
答:
后来人们曾使用过T4DNA聚合酶和T7DNA聚合酶,
两者虽使扩增特异性增加,且使DNA合成速度提高了,但是由于其对热的稳定性差而未能广泛应用
。直到耐热的DNA聚合酶发现,才使得 PCR 技术得到迅速的发展和广泛的应用。Taq DNA 聚合酶 是从一种嗜热水生菌Thermus aquaticus YT-1菌株中分离提纯得到的。是1969...
2021-03-30 用于基因工程的工具
酶
答:
该酶无5'-3'外切活性,保留了5'-3'聚合活性及3'-5'外切活性,基因工程中利用该酶: 修复限制性内切酶造成的5'突出的粘性末端 标记DNA探针 催化cDNA第二条链的合成 末端终止法测序 图2-4 Klenow
酶的
作用方式 (三)
T4
DNA聚合酶 与Klenow酶相似,外切酶活性更高.体外诱变反应中效率很高. (四)
T7 DNA聚合酶
...
t7
连接
酶和t4
连接酶区别
答:
DNA序列和结构选择性。
1、DNA序列:T7连接酶更适用于具有3'端覆盖突出的DNA序列,而T4连接酶更适用于具有3'端粘性末端的DNA序列
。2、结构选择性:T7连接酶对于ATP依赖程度较低,而T4连接酶对于ATP的依赖程度较高。
DNA
主要反映遗传物质的化学组成 怎么理解?
答:
聚合酶有DNA聚合酶
(以DNA为模板合成DNA大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ,大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ大片段(Klenow大片段),
T4
或
T7
噬菌体DNA聚合酶等);RNA聚合酶(以DNA为模板合成RNA,T7或T3噬菌体RNA聚合酶);逆转录酶(以RNA为模板合成DNA,除RNA病毒中发现外,发现大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ
和T
aq DNA聚合酶都有逆转录活性)。
工具
酶的
连接酶:
答:
反应需有Mg2+和ATP存在,pH7.5-7.6。最适温度37℃,30℃以下活性明显下降,但考虑到被连接DNa 的稳定性和粘性末端的退火温度,一般平端连接用20-25℃,粘端连接用12℃左右。
聚合酶有DNA聚合酶
(以DNA为模板合成DNA大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ,大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ大片段(Klenow大片段),
T4
或
T7
...
T4DNA
连接酶
DNA聚合酶
DNA连接酶 RNA聚合酶 区别和需要他们的场所
答:
T4DNA
连接酶用于平末端和黏性末端的连接 DNA连接酶 用于黏性末端的连接,这两种酶都是在基因工程构建基因表达载体时可能会用的酶。RNA聚合酶 是转录时用的酶,哪里有转录哪里就需要
DNA聚合酶
是DNA复制时用的酶,可把单个脱氧核苷酸连接成长链。而DNA连接酶连接的是DNA片段。
什么是
T4
噬菌体
DNA聚合酶
?
答:
T4
噬菌体
DNA聚合酶
(T4:phage:DNA:polymerase)来源于T4噬菌体感染的emphasis:role=italicE.coliemphasis,分子量为114:ku,它是由噬菌体基因43编码的,该酶与Klenow酶相似,具有两种活性,即5′→:3′的聚合酶活性和3′→:5′的核酸外切酶活性,但3′→5′外切活性更强,是Klenow酶200倍。
真核生物复制起点的结构特征
答:
T4和T7
噬菌体DNA通过其末端的简并性使不同链的3'端因互补而结合,其缺口被
聚合酶
作用填满,再经DNA连接酶作用生成二联体。这个过程可重复进行直到生成原长20多倍的多联体,并由噬菌体DNA编码的核酸酶特异切割形成单位长度
的DNA
分子。二、原核和真核生物
DNA的
复制特点 1、原核生物DNA的复制特点 大肠...
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