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dna连接酶能连接平末端吗
平末端
能用
DNA连接酶连吗
答:
可以的
。DNA连接酶分为两类,一类是E。coli DNA连接酶,只能连接黏性末端;一类是T4 DNA连接酶,既能连接黏性末端,又能连接平末端,但连接平末端之间的效率比较低。
连接平末端
的
连接酶
叫什么?
答:
平末端也可以用DNA连接酶连接
,不过效率很低,连接条件需要摸索,一般加入更大量的连接酶还可以加入PEG作为凝聚剂 常用的平末端DNA片段连接法,主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法。
t4
dna连接酶连接
什么
末端
答:
T4DNA连接酶可以连接平末端
,也可以连接粘性末端。现在常用的DNA连接酶有T4DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶。T4DNA连接酶可以连接平末端,也可以连接粘性末端,大肠杆菌DNA连接酶只能连接黏性末端。一般在实验中常用的连接酶是T4DNA连接酶。
DNA连接酶连接
酶
答:
T4 DNA连接酶是一种ATP依赖的酶,它能在DNA双链的5'磷酸基和3'羟基之间形成磷酸二酯键,
适用于接合双链DNA的平末端、相容粘末端以及单链切口
。这种酶通过原核表达、层析纯化技术获得,表现为62kD的蛋白,且产品附带10x Ligation Buffer,其中包含ATP。它在分子生物学中的应用广泛,适用于DNA片段连接和...
大肠埃希菌
dna连接酶
的作用
答:
DNA连接酶可连接平末端,也可连接粘性末端
。反应需有Mg2+和ATP存在。可用于缺口翻译法标记核酸,也可用于DNA序列测定,修补DNA链等。DNA连接酶在pH7.5-7.6。最适温度37℃,在30℃以下活性明显下降,但考虑到被连接DN A 的稳定性和粘性末端的退火温度,一般平端连接用20-25℃,粘端连接用12℃左右...
DNA连接酶
和E. coliDNA连接酶有什么区别?
答:
T4-DNA连接酶即T4 DNA连接酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键
结合
,该催化反应需ATP作为辅助因子。2、连接条件不同 用
DNA连接酶连接
具有互补粘性末端的DNA片段;用T4DNA连接酶直接将
平末端
的DNA片段连接起来,或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA...
DNA连接酶
的主要功能是
答:
DNA连接酶
。DNA连接酶具体功能是在形成重组质粒时,连接目的基因和运载体之间的磷酸二酯键,故A错误。连接磷酸二酯键,故B、D错误。T4 DNA连接酶既能“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端,也能“缝合”双链DNA的
平末端
。E·coli DNA连接酶只能将双链片段互补的黏性
末端连接
。故C正确。考点:本题考查...
想知道E·coli
DNA连接酶
为什么不
能连接平末端
答:
AluⅠ限制
酶能
识别AGCT序列并在G-C之间切割产生平口末端。E·coli
DNA连接酶
只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来,不
能连接平末端
,T4DNA连接酶既可以连接黏性末端,又
可以连接平末端
,但连接平末端的效率较低。看到了吗 问题其实就是答案,这就是一种酶一个作用的酶特点,或者说没有为什么,...
DNA连接酶
既能连接粘性末端,又
能连接平末端
。 这句话对吗?
答:
这个其实是有歧义的,做为判断题时是错的,因为可以举反例:E.coli
DNA
只能
连接平末端
,不
能连
粘性末端
平末端连接
的作用是什么?
答:
T4DNA连接酶也能催化限制性内切酶切割产生DNA平末端的连接。如果目的序列和载体上没有相同的限制性内切酶位点可供利用,用不同的限制性内切酶切割后的粘性末端不能互补
结合
。则可用适当的酶将DNA突出的末端削平或补齐成平末端,再用T4
DNA连接酶连接
,但
平末端连接
要比粘性末端连接的效率低得多。在分子生物...
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