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t4 dna ligase
T4
噬菌体
DNA连接酶
是什么
答:
DNA连接酶是一种在DNA复制、修复和重组过程中发挥作用的、催化两脱氧核糖间以磷酸二酯键接合的酶。DNA连接酶主要用于基因工程,将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性末端重新组合,故也称“基因针线”。
T4DNA连接酶
,来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低。噬菌体T4DNA连接酶分子是一...
DNA连接酶
的分子量是多少?
答:
T4
:
DNA连接酶
:T4:DNA连接酶(T4:DNA:
ligase
)分子量为68ku,催化DNA:5′-P与3′-OH之间形成磷酸二酯键,反应底物为黏端、切口、平端的RNA(但效率低)或DNA。低浓度的聚乙二醇(一般为10%)和单价阳离子(150200mmolL:NaCl)可以提高平端连接速率。T4:DNA连接酶既可用于双链DNA片段互补黏...
DNA连接酶
有哪些
答:
T4DNA连接酶
T4DNA连接酶是ATP依赖的DNA连接酶,催化两条DNA双链上相邻的5′磷酸基和3′羟基之间形成磷酸二酯键。可接双链DNA的平末端、相容黏末端及其中的单链切口,在分子生物学中有广泛的应用。T4DNA连接酶是经原核表达,柱层析纯化获得的高纯T4DNA接酶,SDS-PAGE显示为一条62kD的蛋白条带。本...
DNA连接酶
与
T4连接酶
有什么区别?
答:
一、指代不同 1、E.coli
DNA连接酶
:从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。2、
T4连接酶
:一单链多肽,分子量为68,000道尔顿,它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。二、原理不同 1、E.coliDNA连接酶:一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感,可被其水解。水解后形成的小...
DNA连接酶
和E. coliDNA连接酶有什么区别?
答:
1、作用不同 E.coliDNA 连接酶是生物体内重要的酶,其所催化的反应在DNA 的复制和修复过程中起着重要的作用。
T4
-
DNA连接酶
即T4 DNA连接酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。2、连接条件不同 用DNA连接酶连接具有互补...
T4
dna
ligase
与T4 dna ligase,with PEG的区别,详细介绍中文
答:
1、T4噬菌体中可分离出
T4DNA连接酶
(T4
dna
ligase
),它既可以连接双链DNA片段互补的粘性末端,也可以连接平末端 ,但连接平末端效率相对比较低。但高温易变质。PCR时用Taq。2、聚乙二醇在分子、细胞生物上的作用常常是诱导,PEG400比较适合,150摄氏度时也不会变质。能有较强的吸水性、凝聚和沉淀...
建立
dna
连接体系时应注意什么
答:
1)10xLigationBuffer含有ATP,使用前应在室温放置至融化或用手掌温度辅助融化,然后置于冰上。不要加热融化以免ATP降解。2)
T4DNALigase
对热敏感,容易失活。使用时请放置冰上,用后立即置冰箱中冷冻保存。3)如需在接反应后灭活T4DNALigase,可于65℃孵育10min即可。
连接酶
主要在哪生有
答:
Taq
DNA连接酶
可在两个寡核苷酸之间进行连接反应,同时必须与另一DNA链形成杂交体,相当于连接dsDNA中的缺口,作用在45℃~65℃,需NAD+。可用于检测等位基因的变化以及在PCR扩增中引入寡核苷酸。它不可替代
T4
DNA
ligase
。4.T4 RNA连接酶 T4 RNA连接酶可以催化单链DNA或RNA的5'-磷酸与另一单链DNA...
DNA连接酶
怎么分类
答:
(1)E·coli DNA连接酶,来源于大肠杆菌,可用于连接粘性末端;(2)
T4DNA连接酶
:来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低。(3)热稳定的DNA连接酶(thermostable
DNAligase
),是从嗜热高温放线菌(Thermoactinomycesthermophilus)菌株中分离纯化的,一种能够在高温下催化两条寡核苷酸...
DNA连接酶
与聚合酶有什么区别呢?
答:
DNA
ligase
DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(
T4DNA连接酶
除外),而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。一...
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