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双缩脲法测定蛋白质浓度实验报告
蛋白质浓度测定方法
答:
蛋白质浓度测定方法
如下:1、
双缩脲法 检测
原理:双缩脲是由两分子尿素缩合而成的化合物,在碱性溶液中与硫酸铜反应生成紫红色络合物,此反应即为双缩脲反应。含有两个或两个以上肽键的化合物都具有双缩脲反应。蛋白质含有多个肽键,在碱性溶液中能与Cu2+ 络合成紫红色化合物(540nm)。其颜色深浅与...
双缩脲
试剂
检测蛋白质
原理是什么?
答:
在碱性溶液中双缩脲与铜离子结合形成复杂的紫好色复合物。而蛋白质及多肽的肽键与双缩脲的结构类似,也能与Cu2+形成紫红色络合物,其最大光吸收在540nm处。其颜色深浅与
蛋白质浓度
成正比,而与蛋白质的分子量及氨基酸的组成无关,该
法测定蛋白质
的浓度范围适于1~10mg /mL。
双缩脲法
常用于蛋白质的...
双缩脲法测定蛋白质含量
需注意哪些问题?
答:
双缩脲
试剂由NaOH溶液(0.1g/mL)和CuSO溶液(0.01g/mL)配制而成,配制比例为5:1。但是双缩脲试剂不用现配现用,先加入NaoH营造碱性环境,再加入CuSO。 双缩脲反应主要涉及肽键,因此受
蛋白质
特异性影响较小。蛋白质(protein)是组成人体一切细胞、组织的重要成分。机体所有重要的组成部分都需要有蛋白质...
savag法除
蛋白质
后,怎么
检测
样品中蛋白质的
含量
?
答:
savag法除
蛋白质
后可以用考马斯亮兰法来检测样品中蛋白质的
含量
。具体操作步骤:(一)
实验
原理
双缩脲法
(Biuret法)和Folin—酚试剂法(Lowry法)的明显缺点和许多限制,促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法(Bradford法),是根据蛋白质与染料相结合的...
蛋白质浓度测定
双缩脲法实验
原理?
答:
蛋白质浓度测定
双缩脲法
原理 将尿素加热,两分子尿素放出一分子氨而形成双缩脲(NH2-CO-NH-CO-NH2).双缩脲在碱性溶液中与Cu2+结合生成紫色络合物,这一呈色反应称为双缩脲反应.蛋白质分子中的肽键类似双缩脲结构,故亦能呈双缩脲反应.
双缩脲
试剂是如何
检测蛋白质
?
答:
双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。可通过比色法分析
浓度
。
双缩脲法测定蛋白质
的优缺点:优点:双缩脲法测定蛋白质的测定范围是1~10mg蛋白质,...
蛋白质
的
检测
必须依次加入
双缩脲
试剂,其原因是?
答:
是按
实验
原理得到的,蛋白质在碱性条件下和二价铜离子作用生成紫色物质,这样才能
检测蛋白质
的
含量
。
双缩脲
试剂中真正起作用的是硫酸铜,而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境。因此,在使用双缩脲试剂时候,必须是先加0.1g/mL氢氧化钠溶液,再加0.01g/mL硫酸铜的水溶液。若先加入硫酸铜溶液,再加入氢...
双缩脲法测定蛋白质含量
需注意哪些问题?
答:
双缩脲
试剂由NaOH溶液(0.1g/mL)和CuSO溶液(0.01g/mL)配制而成,配制比例为5:1。但是双缩脲试剂不用现配现用,先加入NaoH营造碱性环境,再加入CuSO。 双缩脲反应主要涉及肽键,因此受
蛋白质
特异性影响较小。蛋白质(protein)是组成人体一切细胞、组织的重要成分。机体所有重要的组成部分都需要有蛋白质...
双缩脲法测蛋白质含量实验
调零的目的是什么
答:
目的是学习蛋白质含量测定的原理和方法。
双缩脲法测定蛋白质含量实验
中,双缩脲是在大约180°C条件下加热两个尿素分子,以达到释放出一个氨分子而获得的产物。在强碱性溶液中,缩二脲和硫酸铜形成紫色络合物,称为缩二脲反应。任何包含两个酰胺基或两个直接连接的肽键或可以通过中间碳原子连接的肽键的...
测定蛋白质含量
的
方法
有哪些,其原理各是什么
答:
Bradford
法测定
bai
蛋白质浓度
:
实验
原理。
双缩脲法
(duBiuret法)和zhiFolin—酚试剂法(Lowry法)的明显缺点和许多限制dao,促使科学家们去寻找更好的蛋。取6支试管分别标号,前5支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液,最后一支试管加待
测蛋白质
溶液,不加标准蛋白溶液,每支试管液体总量通过加入蒸馏水...
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