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封闭液封闭时间
western blot中
封闭
起什么作用
答:
所以有”封闭“的说法。同样这两种作用使封闭液中的蛋白能够狠牢固的结合在空白位置上,这样抗体蛋白就不会被非特异性的吸附到膜上,而只会跟特异性蛋白结合。
封闭液封闭
所有的未结合位点而不替换表面上的靶蛋白,不结合靶蛋白表位,也不与抗体或检测试剂有交叉反应。【摘自网络】
铝氧化的
封闭
处理
答:
其原理是:在较高温度下,氧化膜和重铬酸盐产生化学反应,反应产物碱式铬酸铝及重铬酸铝沉淀于膜孔中,同时热溶液使氧化膜层表面产生水化,加强了封闭作用。故可认为是填充及水化双重封闭作用。通常使用的封闭溶液是5~10%的重铬酸盐水溶液,操作温度为90~95℃,
封闭时间
为30分钟,溶液中不得有氯化...
wb
封闭液
可以重复使用吗
答:
可以。在wb
封闭液
使用方法中了解到该产品是可以重复使用的,是可以进行3次重复使用的,该产品是最新一代的即用型、高效快速Western封闭液。
无菌溶液开瓶后有效期是什么?
答:
无菌溶液开瓶后有效期为24小时。但需要无菌
封闭
状态,用消毒棉签封闭。而注射液没有稀释,最多可以保留2小时, 稀释后是可以保留
时间
长一些的。不同材料包装的无菌物品有效期不同:1、纺织品包装材料(棉布)包装的无菌物品有效期是7天;2、医用包装无纺布包装的无菌物品有效期是3个月;3、纸塑包装袋包装...
western blot中
封闭
起什么作用
答:
在Western blot实验中,封闭步骤至关重要。其作用在于转膜后,固相载体如NC膜或PVDF膜的表面,尽管被蛋白填充,但仍存在许多空隙。如果不进行封闭,抗体可能会非特异性地吸附到这些空隙,导致背景信号增加,影响实验结果的准确性。
封闭液
的主要任务是填补这些空隙,通过机械性堆积和吸附,防止未结合的蛋白质...
封闭液
-20度有什么影响吗
答:
质量变差。
封闭液
可以回收利用,在-20度保存,但重复用多次后封闭液质量流失,效果也会变差。封闭液是用于Western时转移了蛋白样品的PVDF膜或NC膜的封闭,封闭后,可以减小后续的一抗或二抗和膜的非特异性结合,降低背景,增信噪比。
二抗用奶粉稀释
答:
一抗是用
封闭液
稀释的,二抗用TBST;AB液1:1混合后即可;封闭液直接买的现成品,不贵,效果也很好;抗体孵育的时候用杂交袋,可以减少抗体的用量;显影定影用国产几块一包的即可。封闭液是PBST配置的5%脱脂奶粉。一抗稀释用的是 封闭液和PBST 1:1混匀,现用现配,4度过夜。二抗直接用PBST稀释,...
免疫组化中的BSA(牛血清白蛋白)介绍及作用
答:
探索免疫组化的守护者:BSA的神秘世界与深远影响 在免疫组化实验的精密舞台上,牛血清白蛋白(BSA)如一位不可或缺的幕后英雄。作为最常用的
封闭液
,BSA以其卓越的特性在众多场景中展现其作用,避免了抗原抗体间的混淆,确保实验结果的纯净。BSA封闭液的魔法 固相载体的表面如同无数小孔,等待着BSA的...
Western blot 转膜后的
封闭
,过夜时未放到4度会怎样?
答:
没事。过夜放四度主要是怕长细菌。其实一夜长不了多少细菌,只是为了小心而已。你可以闻闻
封闭液
臭了没有,没有明显异味就说明没有长多少细菌,可以继续做下去。如果有明显的臭味,说明细菌已经爆发繁殖,已经把膜上的蛋白破坏掉并且污染了膜,需要扔掉重做。
Western blot 实验技术及常见问题分析?
答:
答:转膜前PVDF膜没有用100%甲醇完全浸湿;洗膜不充分,可以增加膜洗涤次数;封闭不完全,选择合适的
封闭液
和提高
封闭时间
;二抗浓度过高,降低二抗浓度;一抗特异性不强,换用特异性较强的单克隆抗体;曝光时间过长,减少曝光时间。 24结果没有条带或者条带很浅,杂交信号很弱?答:样品中不含靶蛋白或者含量太低,可增加...
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