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蛋白纯化洗脱液
蛋白质
层析、超滤常用技术手段
答:
当
蛋白质
移动至环境PH高于其PI时,蛋白质由带正电行变为带负电荷,并与阴离子交换剂结合。由于洗脱剂的通过,蛋白质周围的环境PH 再次低于PI时,它又带正电荷,并从交换剂解吸下来。随着
洗脱液
向柱底的迁移,上述过程将反复进行,于是各种蛋白质就在各自的等电点被洗下来,从而达到了分离的目的。 不同蛋白质具有不同...
如何进行阳离子交换柱层析的
洗脱
?
答:
这种方法特别适用于对温度敏感的生物分子,如
蛋白质
、酶等。在温度洗脱过程中,通常需要选择适当的温度条件,以使生物分子与树脂的结合力减弱,从而实现有效的分离和
纯化
效果。5、溶剂梯度洗脱:溶剂梯度洗脱是一种常用的层析技术,通过改变
洗脱液
的极性或疏水性来改变生物分子与树脂的结合状态,适用于不同...
如何利用透析法进行脱盐浓缩
蛋白
?
答:
我利用盐酸胍裂解了融合表达的包涵体
蛋白
然后亲和
纯化
,现在想要脱盐处理,不知道如何配置脱盐用的透析液,有什么样的原则,请教高手帮忙了!... 我利用盐酸胍裂解了融合表达的包涵体蛋白然后亲和纯化,现在想要脱盐处理,不知道如何配置脱盐用的透析液,有什么样的原则,请教高手帮忙了! 展开 1...
电泳法分离混合
蛋白质
的基本原理是什么
答:
因此
蛋白质
混合物的分离可以由改变溶液中的盐离子强度和pH完成,对离子交换剂结合力小的蛋白质先从层析柱中洗脱出来。 层析洗脱,采用保持
洗脱液
成分一直不变的方式洗脱,也可以采用改变洗脱的盐浓度或(和)pH的方式洗脱。后一种方式又分为:跳跃式洗脱和渐进式的连续改变。采取前一种方式洗脱称为分段洗脱,后一种方式...
亲和层析的操作步骤?
答:
⑶ 洗柱:以0.2Mol/L pH 9.0 NaHCO3(含0.1Mol/L NaCl)洗涤至洗出液的OD280<0.02为止。收集全部的
洗脱液
,测得的OD280值×洗脱液的总ml数即为未偶联
蛋白
的含量,由此可计算偶联率。4.吸附与解吸附 ⑴按床体积1/10加样,浓度为1%~2%,缓慢加入待
纯化
的抗体(或抗原),用0.01Mol...
如何将多克隆抗体进行分离
纯化
?
答:
2. 待
纯化
标本:杂交瘤腹水或培养上清,免疫血清或饱和硫酸铵粗提品。3. 1.5×50cm 层析柱;透析袋及其他透析和层析所需的试剂和器材。4. 梯度
洗脱液
包括:0.005 mol/L,pH8.6 Tris-PO4 ;0.055mol/L,pH6.0 Tris-PO4 ;0.5mol/L,pH5.1 Tris-PO4 。操作步骤 1.
蛋白
标本对0....
阳离子交换柱层析的
洗脱
顺序
答:
这种方法特别适用于对温度敏感的生物分子,如
蛋白质
、酶等。在温度洗脱过程中,通常需要选择适当的温度条件,以使生物分子与树脂的结合力减弱,从而实现有效的分离和
纯化
效果。5、溶剂梯度洗脱:溶剂梯度洗脱是一种常用的层析技术,通过改变
洗脱液
的极性或疏水性来改变生物分子与树脂的结合状态,适用于不同...
蛋白质
和核酸能通过teb urea胶分离吗
答:
当
蛋白质
移动至环境pH高于其PI时,蛋白质由带正电行变为带负电荷,并与阴离子交换剂结合。由于洗脱剂的通过,蛋白质周围的环境pH 再次低于PI时,它又带正电荷,并从交换剂解吸下来。随着
洗脱液
向柱底的迁移,上述过程将反复进行,于是各种蛋白质就在各自的等电点被洗下来,从而达到了分离的目的。 不同蛋白质具有不同...
分离
纯化
酶的过程主要包括哪三种酶的浓缩干燥剂结晶?
答:
其工作原理是:当溶液中欲被分离的蛋白质不受阻碍地通过超滤膜的孔隙时,如果在膜的一侧结合着亲和配基,该蛋白质就会与配基结合因而结聚在膜的这一侧。不与配基结合的其他物质就将穿过孔而被带走。再用适宜的洗脱剂将该
蛋白质洗脱
下来,
洗脱液
用于进一步的分离
纯化
。
怎样提取藻蓝
蛋白
答:
沉淀用5ml,0.02mol/L pH6.5的磷酸缓冲
液
溶解。以硫酸铵饱和度为横坐标,藻胆蛋白浓度为纵坐标作图,得藻蓝蛋白盐析曲线。C=(A620-0.474A650)/5.34 (mg/ml)A620、A650分别为在620、和650nm下的吸光度,以磷酸缓冲液调零。3、藻胆
蛋白纯化
(1)称取 (NH4)2SO4固体粉末,分多次缓慢...
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