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融合蛋白表达载体的构建
HERP建设是什么意思
答:
摘要应用酵母双杂交技术筛选Herp的相互作用蛋白。
构建
编码Herp的基因HERPUD1真核
表达载体
HERPUD1?plexA,应用MATCHMAKER LexA酵母双杂交系统筛选人胎脑cDNA文库,获得的阳性克隆的插入子为Herp的候选相互作用
蛋白质
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转录因子相关调控研究案例(二)
答:
B、co-IP,用纯化的带标签
融合
HIF1和Ser797位点突变的HIF1与细胞总
蛋白
孵育,然后用标签抗体钓取结合蛋白进行WB验证,表明Ser797位点突变的HIF1不能与P300结合。C、将LINK-A全长和BRK、LRRK2结合位点突变的
表达载体
导入细胞,然后检测经HB-EGF诱导后的磷酸化的HIF1,表明LINK-A的BRK、LRRK2结合位点...
高中生物选修三知识点总结
答:
第二步:基因
表达载体的构建
1.目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。2.组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因(1)启动子:是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的
蛋白质
。(2)终止子:...
去哪购买比较好点的PGK启动子的
载体
?
答:
pYP2质粒由本实验室
构建
,它带有PGK启动子及色氨酸合成酶基因,PGK启动子后的BamHⅠ和KpnⅠ切点间插入用于
表达的
cDNA。1.3 PCR引物 酵母pPC86
载体
cDNA插入5'端Gal4激活功能域侧的引物为:GAL4(5'-GGATGTTTAATACCACT-3'),3'端ADH终止子侧的引物为:TAD4(5'-TTGATTGGAGACTTGACC-3')。水稻谷胱甘肽氧还
蛋白
cDNA...
4T-1
载体
GST在基因的上游还是下游
答:
GST标签序列,GST标签位于融合基因的N端,是一种高效的
蛋白表达载体
。Tac启动子在没有诱导物存在的情况下,质粒上携带的lacIq基因产物可以有效抑制tac启动子的转录。可在BL21、Rosstea等表达菌株中高
表达融合
有GST标签的蛋白,且用凝血酶可将目的蛋白的GST标签切掉,便于下游蛋白纯化。质粒图谱如下:...
酵母双杂交系统到底是啥回事?有啥用
答:
二个结构域不但可在其连接区适当部位打开, 仍具有各自的功能。而且不同两结构域可重建发挥转录激活作用。酵母双杂交系统利用杂交基因通过激活报道基因的
表达
探测蛋白-
蛋白的
相互作用。主要有二类
载体
: a 含DNA -binding domain的载体; b 含DNA-activating domain的载体。上述二类载体在
构建融合
基因时, ...
能否抑制某一特地
蛋白
,基因敲除方法除外。
答:
给把单克隆抗体的基因偶联上绿色荧光
蛋白的
基因在大肠杆菌中一同
表达
,两者之间共价键链接,首先还要要把抗一种将抗来源于动物细胞的某一氧化还原酶的单克 隆抗体的基因分离出来导入大肠杆菌这也是一种实验方法,不过
构建
基因,联入DNA
载体
,导入细胞,阳性克隆筛选,工作量可不小,我是不这样实验的,时效比 太低。还有其他...
单克隆抗体与基因克隆技术相结合
答:
E-tag为源于人c-myc基因的一段序列,对ScFv基因的结构和活性均无影响,可作为可溶性ScFv蛋白的标签,用抗E-tag抗体来检测ScFv基因的
表达
并纯化其产物。我们用含有ScFv基因的重组噬菌粒
载体
转化大肠杆菌HB2151,经IPTG诱导获得可溶性表达产物。用抗E-tag抗体做Western blot证实,表达产物为ScFv-E-tag
融合蛋白
。流式细胞仪...
mbp名词解释
答:
CBNumber: CB5753716 分子式: C74H114N20O17 分子量: 1555.82 MBP(Maltose Binding Protein)大肠杆菌麦芽糖结合蛋白 大肠杆菌malE基因编码的蛋白,是细菌麦芽糖转运系统的成员之一,主要负责麦芽糖的摄取及分解代谢 。malE基因产物能与多种
蛋白融合
,是进行表达研究的有效媒介,由于MBP
融合蛋白
原核
表达载
...
酵母双杂交技术原理
答:
二类
载体
酵母双杂交系统利用杂交基因通过激活报道基因的
表达
探测蛋白-
蛋白的
相互作用。主要有二类载体: a 含DNA -binding domain的载体; b 含DNA-activating domain的载体。上述二类载体在
构建融合
基因时, 测试蛋白基因与结构域基因必须在阅读框内融合。融合基因在报告株中表达,其表达产物只有定位于核内...
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