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克隆文库中,怎样检测阳性克隆子?
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第1个回答 2013-06-03
最常用的方法是在PCR之后 用Northern杂交的方式检测 这个效果很好的 当然了 如果实验室里面有专用的芯片就更好了
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建立了一个基因
文库
后
,如何
鉴定一个携带目的基因的
克隆?
答:
先做一个目的基因的探针,然后杂交筛选
阳性克隆
。然后克隆扩增,再测序确定。
cDNA
文库
的筛选鉴定
答:
1
核酸杂交是最常用
,最可靠的方法之一.可大规模地分析文库的克隆子.1)同源探针:至少含有所需cDNA克隆的一部分确切序列.常用于以一个部分克隆分离cDNA文库中的全长克隆.2)部分同源探针:探针的序列与所要筛选的cDNA克隆的序列相关但不相同.常用于克隆家族基因.3)总cDNA探针:通过反转录酶均匀掺入放射性...
通过RT-PCR 和RACE 法为什么可以分离出基因
答:
而用 PCR 法从 cDNA 文库中快速克隆基因的方法,只需提取 λ 噬菌体 DNA,按保守序列设计 PCR 引物便可将未知片段进行克隆
。特别是在基因的两端变异较大而中间某区域保守的情况下,用 PCR 法很容易获取 cDNA 的全长。同一转录产物,又是存在着不同的拼接方式,通过筛库的办法同时将不同拼接方式的克...
如何
从基因
文库中
筛选目标
克隆
答:
你的cDNA文库不是保存在宿主里吗?
以前的方法是做大量的平板,然后用原位杂交的方法去筛选阳性的克隆
,多筛几次就好了,但做平板其实很累的。现在的方法可以用RACE钓取全长的cDNA。关于RACE,你可以咨询试剂公司,有现成的试剂盒和方法可用。
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