第1个回答 2013-11-27
叶绿素的提取①取材时要选取新鲜的颜色较深的叶片，是因为以便使滤液中含较多的色素.②提取液除丙酮外，也可用酒精替代，结果大致相同。和酒精相比，丙酮有一定毒性，因而不妨换一换。如果用丙酮，用量改为5mL，并加入2mL石油醚，可以提高胡萝卜素提取效果，色素带分离现象更明显。研磨时加入二氧化硅的目的是为了研磨得充分，更有效地破坏细胞结构；但由于二氧化硅是特别细的白色粉末，再加上控制不好用量，往往过量，使滤液中含有较多的二氧化硅，而导致滤液颜色变浅。滤液中杂质越多，实验现象越不明显。有实验证明，改用白细河沙 (洗净干燥后用)代替二氧化硅粉末，这样研磨更充分，滤液中减少了杂质的含量，颜色变得深绿，实验效果明显。加入少许碳酸钙的目的是为了防止在研磨过程中，叶绿素受到破坏。因为叶绿素是一种含镁的化合物，其中的镁易被H+、Cu2+、Zn2+等取代。当被H+取代后，就形成去镁叶绿素，呈黄褐色。虽然研磨过程中不发生产生大量H+的化学反应，但液泡中常含有多种有机酸，当细胞破裂时，液泡中的有机酸的氢可取代镁原子而成为褐色的去镁叶绿素，碳酸钙可中和有机酸以防止去镁反应的发生。③将绿叶放入研钵并加入细河沙和碳酸钙，可先研磨一段时间后加入提取液再迅速、充分研磨。这是因为：一是丙酮容易挥发；二是为了使叶绿体完全破裂，从而能提取较多的色素；三是叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而破坏。④过滤时用脱脂棉而不用滤纸原因有三:1色素分子比较大，不容易透过滤纸;2滤纸有较强的吸附能力而使色素吸附在滤纸上，从而降低色素浓度,影响实验效果;3叶绿素等色素分子是脂溶性,根据相似相溶原理,用脱脂棉可减少实验过程中色素的流失,增强实验效果.滤液过滤到试管中后，应用棉塞将试管口塞紧并遮光，以防止丙酮的挥发和色素遇空气被氧化。⑤用白粉笔代替滤纸条，效果更好，有好多学生对“不让滤液细线触及到层析液”这一点做的不是很好，如果改用粉笔，粉笔比滤纸好控制多了。⑦设立对照实验 在多年教学中发现一个很值得注意的问题：总有少部分同学怀疑不同色带是层析液在粉笔上扩散后留下的颜色。与其花功夫给学生解释这个问题，不如设立一个空白对照组，在其他条件完全相同的情况下，一个画滤液细线，而另外一个不画，结果进行对照，学生一目了然，这样同时也培养了学生严谨的实验作风，体现了生物学科研的基本原则。