1、根据已发表的相关序列，分别设计引物，通过PCR技术克隆了一系列构建水稻质体多顺反子定点整合表达载体所需的元件：质体核糖体（16S)RNA操纵元启动子（Prrn）、质体psbA基因3′端终止子（psbA3′）、氨基糖苷3′-腺苷酰基转移酶基因（aadA）、水稻质体基因组高频同源重组片段（psbC/trnG，大小3362bp），命名为crDNA、甘露聚糖酶基因（man）、绿荧光蛋白基因（gfp）。构建了水稻质体多顺反子定点整合表达载体pLM21(-psbC-Prrn-RBS-man-RBS-gfp-RBS-aadA-psbA3′-trnG-）。将该载体用基因枪轰击烟草叶片5枪，用添加了壮观霉素的选择分化培养基筛选。结果获得质体转基因烟草4株。用PCR、激光扫描和Westernblot等方法检测都证实man、gfp、aadA三个基因且均得到表达，用RFLP证实表达盒整合到烟草质体基因组中。
2、利用脑心肌炎病毒(EMCV）及脊髓灰质炎（Polio）病毒内核糖体进入位点（IRES），连接mIL-12p40及p35cDNAs和筛选基因新霉素磷酸转移酶(NeoR），克隆至逆转录病毒载体pGCEN中，使三个基因同时受逆转录病毒载体5′端LTR启动子控制，转录至同一mRNA转录本上，通过不同机制翻译成蛋白质，从而构建成多顺反子逆转录病毒载体，即pGCEN/mIL-12。在LipofectAMINE介导下将pGCEN/mIL-12转染包装细胞PA317，G418筛选，直至出现阳性克隆，挑取抗性克隆，扩大培养，收集上清，用小鼠成纤维细胞NIH3T3测定病毒滴度。然后用重组转录病毒感染小鼠肝癌细胞筛选，直至出现抗性克隆，扩大培养，对阳性克隆进行鉴定。结果是由PA317包装细胞产生的重组逆转录病毒的滴度为5×105CFU/ml，将其感染小鼠肝癌细胞，后经PCR及Southernblot证明，外源基因已整合至小鼠肝癌细胞基因组中，RT-PCR及Northernblot分析外源基因在mRNA水平上的表达，并证实mIL-12p40及p35cDNA和NeoR基因转录在同一mRNA上。ELISA显示mIL-12的表达量48h为10ng/106细胞。并且M45/mIL-12培养上清能刺激人外周血单个核细胞增殖及诱导小鼠脾细胞IFN-γ的产生（160U/ml）。
3、目前一种新的基因治疗策略，即将不同耐药谱基因导入正常骨髓造血干细胞之获得耐药表型，加大造血细胞与肿瘤细胞克隆之间对化疗耐受性的差别，增加骨髓对化疗的耐受性，以便能施行大剂量化疗、多次重复给药使之最大限度清除肿瘤细胞，发挥化疗效，为保护和及时恢复造血功能提供了可行性。
