红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2，我们可

Question

红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白．请回答下列有关问题：（1）血红蛋白的提取和分离一般可分为四步：______、______、______和______．（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液．①加入柠檬酸钠的目的是______②以上所述的过程即是样品处理，它包括______、______、______、透析．（3）收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离．①透析的目的是______②透析的原理是______（4）然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定．样品纯化的目的是______（5）提取细胞膜经常使用的材料是哺乳动物的成熟红细胞，原因是：______．

Answer 1

（1）血红蛋白的提取和分离一般可分为：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步．
（2）样品处理过程分为红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液和透析四步，实验前取新鲜的血液时，在采血容器中应预先加入柠檬酸钠，以防止血液凝固．
（3）血红蛋白的粗分离是通过透析完成的，透析的目的是除去分子量较小的杂质，原理是透析袋是半透膜，能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内．
（4）样品纯化是通过凝胶色谱法除去分子量大的杂蛋白．
（5）由于哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核、没有线粒体等由膜系统构成的细胞器，提取的细胞膜相对单一，只有细胞膜，因此取细胞膜经常使用的材料是哺乳动物的成熟红细胞．
故答案为：
（1）样品处理   粗分离  纯化   纯度鉴定
（2）①防止血液的凝固②红细胞的洗涤  血红蛋白的释放  分离血红蛋白溶液
（3）①将样品中分子量较小的杂质蛋白除去     ②透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内
（4）通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去
（5）因为哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核、没有线粒体等由膜系统构成的细胞器，这样提取的细胞膜相对较纯