第1个回答 2016-12-26
构建表达载体首先取决于你的实验目的，例如你的实验是否要求你的蛋白表达出来必须可溶性蛋白，载体上面的标签决定了你的纯化方法，当然也决定了实验成本，等等一系列需求。 拿带标签的载体为例，因为带标签后可以增加蛋白质的可溶性，也为纯化带来了方便，一般都会采用。标签一般都是在目的蛋白的N端，这样就需要考虑读码框的问题，一定要与前面的读码框保持一致。 利用酶切连接的方法连入目的载体这个应该都知道，或者用gateway系统，非常方便，我就经常用gateway载体，构建起来速度呼呼的。 基本就是这些了吧，主要就考虑选择什么标签和读码框别错了。 有什么问题可以直接发信给我本回答被提问者采纳