细菌pcr鉴定的结果存在一定的假阳性,如何进一步确认其阳性

如题所述

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第1个回答 2014-06-18

将PCR确定阳性挑选出几个克隆，培养后进行提质粒，酶切，电泳鉴定是否有目标片段插入，可以避免假阳性。

另外，最保险的办法就是，酶切确认过的克隆，再送去测个序，保证目标片段的序列是完全正确的。

当然，也可以直接取几个单克隆去测序，看哪一个是阳性。本回答被提问者和网友采纳

第2个回答 2014-06-16

电泳，纯化，测序

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细菌pcr鉴定的结果存在一定的假阳性,如何进一步确认其阳性?答：将pcr确定阳性挑选出几个克隆，培养后进行提质粒，酶切，电泳鉴定是否有目标片段插入，可以避免假阳性。另外，最保险的办法就是，酶切确认过的克隆，再送去测个序，保证目标片段的序列是完全正确的。当然，也可以直接取几个单克隆去测序，看哪一个是阳性。

pcr如何鉴别假阳性答：如不一致，定是假阳性，如一致还不确定还可继续使用，聚丙烯酰胺凝胶电泳，将双链解离再次进行电泳。和生物公司合成的目的片段进行对比。如果结果一致，可以有98%的概率认为目的产物和所需产物一致。

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