金欧亚®凝胶色谱法原理:是利用被分离物质分子量大小、形状的不同导致在填料上渗透程度不同使组分分
离(分子筛原理),大分子物质由于扩散受阻,在凝胶中行径较短而最先洗脱下来,进入凝胶内的小分子物
质按分子大小由大至小被洗脱下来,从而达到相互分离的目的,根据样品的性质选用水、缓冲溶液加盐或有
机溶剂作为流动相。
1、在室温下,将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时,并不断搅拌以保证凝胶溶胀,抽滤,用无盐水洗去
残存的乙醇;在无盐水中充分溶胀24小时。
2、将溶胀后的凝胶脱气后(真空或超声波)根据装柱要求一次性均匀置入柱内,注意保证湿态装柱,并避免
柱内产生气泡和断层。
3、上样前缓冲溶液平衡层析柱至少二--三个柱体积直到记录仪基线变的平稳为止(流出液的pH值等于
Buffer的pH值)。
4、凝胶过滤的上样量一般为5-7%的床体积,我们建议初次上样量控制在1-2%的床体��臃掷肭榭隹梢灾?
步增加;柱高的选择也与分离要求相关,难分物质要有一定柱高和流速控制。
参考资料:http://www.chromatogr.com/ershou/pjtnj.htm
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