44问答网
所有问题
设计引物时怎么防止引物自连
如题所述
举报该问题
其他回答
第1个回答 2022-07-14
设计的引物之间不能有碱基互补配对。
否则引物自连,而不能与模板相连。
相似回答
2020-12-06
引物设计
--小结
答：
当设计多义引物时应尽量减少引物多义性
，这样会带来更好的特异性，应尽量避免3’末端的多义性，因为这里即使一个碱基的错配都能阻止引物延伸。 四、3’ End Stability 3 末端稳定性 3’端避免以A结尾，最好是G或者C，T也可以；3’避免出现连续的3个碱基相连的情况，比如GGG或 CCC，否则容易引起错配...
怎么设计引物
答：
引物的3’端避免使用 碱基 A，引物的3’端避免出现3个或3个以上连续相同的碱基 为避免的扩增
，引物设计最好能跨两个 外显子 。Taqman探针技术要求片段长度在50bp-150bp 引物末端(最后5个核苷酸)不能有超过2个的G和C。
...产生不同的3'突出粘性末端。
设计
实验方案,构建重组质粒。_百度知 ...
答：
方法非常多，
列举一两个：1.不同的粘性末端不能相连。所以，如果要相连，就要去除不同的粘性末端，进行平末端相连
。粘末端变成平末端有两种方法：klenow酶的补平或者s1核酸酶的切平。为了减少载体自连，
可以用碱性磷酸酶处理载体
。最后将载体和目的基因链接，构建重组质粒。2.设计引物，自带酶切位点，...
怎样防止
限制性核酸内切酶切割后的单个目的基因
连接
成环
答：
1、双酶切，产生2个不同的缺口；2、酶切后用绿豆磷酸酶处理，去除羟基端的磷酸基团就不会
自连
了
大家正在搜
设计引物时需要避免引物之间形成
设计引物时需要注意什么
qPCR引物设计时产物长度
设计引物时的注意事项
pcr引物设计时应注意哪些问题
设计引物时在5’端加
ncbi设计引物时参数
设计引物时在5’端减碱基
引物设计时以正向链还是反向链为主