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常用的连接酶
常见的连接
质粒和目的基因的
酶
有哪些?
答:
DNA连接酶(DNA
Ligases):DNA连接酶是一种酶类,能够将两个DNA分子的末端连接起来。在基因工程中,DNA连接酶用于将质粒和目的基因的DNA片段连接在一起。T4 DNA连接酶是一种常用的DNA连接酶,它可以在连接处形成磷酸二脱氧核苷酸的磷酸二脱氧核苷酸磷酸二脱氧核苷酸磷酸二脱氧核苷酸磷酸二脱氧核苷酸磷酸二...
t4连接酶
可以4度连接过夜吗
答:
可以。
T4连接酶是一种常用的DNA连接酶
,在16至25°C下进行连接反应。T4连接酶在4°C下可以进行连接反应,连接效率会大大降低。需要在较低温度下进行连接反应,可以使用其他类型的连接酶,如TaqDNA连接酶和E.coliDNA连接酶,在低温下的连接效率会更高。
连接酶
主要在哪生有
答:
1.T4 DNA 连接酶
T4 DNA连接酶的分子量为68kDa,催化DNA5'磷酸基与3'羟基之间形成磷酸二酯键。反应底物为粘端、切口、平端的RNA(但效率低)或DNA。低浓度的聚乙二醇PEG(一般为10%)和单价阳离子(150-200mM NaCl)可以提高平端连接速率。一般采用Weiss单位来衡量T4 DNA连接酶的活性。在37℃下...
t4dna
连接酶
连接什么末端
答:
现在常用的DNA连接酶有T4DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶
。T4DNA连接酶可以连接平末端,也可以连接粘性末端,大肠杆菌DNA连接酶只能连接黏性末端。一般在实验中常用的连接酶是T4DNA连接酶。
DNA连接酶
主要包括( )和( )两类
答:
您好,(1)
E·coli DNA连接酶
,来源于大肠杆菌,可用于连接粘性末端;(2)T4DNA连接酶:来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低。(3)热稳定的DNA连接酶(thermostableDNAligase),是从嗜热高温放线菌(Thermoactinomycesthermophilus)菌株中分离纯化的,一种能够在高温下催化两条寡...
为什么E. coliDNA
连接酶
可以连接DNA?
答:
T4-DNA连接酶即T4 DNA连接酶
,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。2、连接条件不同 用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段;用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来,或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA...
重组dna技术中
常用的
工具
酶
答:
限制性核酸内切酶、
DNA连接酶
等工具酶。1、限制性核酸内切酶(RestrictionEndonucleases):酶能够识别特定的DNA序列,在该序列上切割DNA分子。起到了“剪刀”的作用,可以产生特定的片段。2、DNA连接酶(DNALigases):酶能够将两个断裂的DNA片段连接起来。通过催化磷高效地将两端相互配对并形成磷铵键,从而...
DNA
连接酶
有什么作用?
答:
在连接反应中以ATP为辅助因子,是应用最广的连接酶,有商品供应。它的用途是:①连接带匹配粘端的DNA分子,②使平端的双链DNA分子互相连接或合成的接头相连接。大肠杆菌
DNA连接酶
能使互相匹配的5′突出端和3′突出端的双链DNA连接,反应中以NAD+作为辅助因子,基因工程不常用。
基因工程
常用的酶
有
答:
基因工程中常用的酶有逆转录酶、限制性核酸内切酶、
DNA连接酶
、DNA聚合酶、DNA修饰酶等。基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性...
连接平末端
的连接酶
叫什么?
答:
DNA连接酶
平末端也可以用DNA连接酶连接,不过效率很低,连接条件需要摸索,一般加入更大量的连接酶还可以加入PEG作为凝聚剂 常用的平末端DNA片段连接法,主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法。
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