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PCR反应
PCR
的原理是什么,它有什么用途?
答:
简称
PCR
。聚合酶链式
反应
,其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究...
pcr反应
正确过程
答:
1.DNA 模板 2.特异性引物 3.dNTP Mix 4.
PCR
buffer 5.热启动酶 二.操作步骤 1.配置
反应
体系 将各成分依次加入到 0.5ml 的离心管中 扩增使用热启动酶,可在常温下操作,非热启动型的酶要在低温配置反应体系。2.按照试剂盒说明书设置反应时间和温度,扩增结束后电泳鉴定 3.琼脂糖核酸电泳 · ...
简述
PCR
技术原理和步骤。
答:
【答案】:DNA聚合酶链式
反应
技术简称
PCR
技术,是一种以模板DNA为基础,在引物和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下,利用DNA聚合酶的酶促反应,完成对模板的目的片段的快速扩增的过程,其依赖于3个温度的反复循环。每一循环的3个步骤为:(1)变性:即双链DNA在94℃条件下,通过热变性使模板的双链DNA氢键...
影响
PCR反应
效率的因素有哪些?如何有效地提高PCR反应的效率?
答:
影响
PCR反应
效率的因素主要包括以下几个方面:1. 温度循环参数:在PCR自动热循环中,变性与退火的温度是关键因素。变性温度应设定在90~95℃,以确保双链DNA解链产生单链DNA模板。退火温度应根据引物的(G+C)%含量进行调整,以提高PCR的特异性和产量。延伸温度通常设定在70~75℃,以适应Taq DNA聚合...
什么是聚合酶链
反应
(
PCR
)?
答:
聚合酶链
反应
(
PCR
)的基本原理是一种酶促合成反应。即在模板DNA、引物和脱氧核糖核苷酸存在下,在DNA聚合酶的作用下,使DNA链扩增延伸。试验先通过加热变性,使DNA双螺旋的氢链断裂,解离成单链DNA;然后通过退火,突然降温使引物与其互补的模板在局部形成杂交链;然后再在DNA聚合酶、脱氧核糖核苷三磷酸...
PCR
实验原理和操作步骤是什么?
答:
实验方法原理 ①模板DNA的变性:模板DNA经加热至94℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经
PCR
扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮
反应
做准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的...
简述
PCR
技术操作步骤
答:
PCR
即聚合酶链式
反应
(Polymerase chain reaction)的缩写,它是体外酶促合成特异DNA片段的方法。这一方法的要点是合成两个分别互补于待扩增DNA片段两端的小片段引物,在含有引物、待扩增DNA模板核苷酸底物和DNA多聚酶的反应体系中DNA复制反复进行,在短时间内可以取得大量扩增产物。其原理是寡聚核苷酸链引物...
什么是聚合酶链式
反应
(
PCR
)?
答:
聚合酶链式
反应
(英文:Polymerase chain reaction,缩写:
PCR
),是一种分子生物学技术,用于扩增特定的DNA片段,这种方法可在生物体外进行,不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。这种方法由凯利·穆利斯(Kary Mullis)于1983年开发,当时他是Cetus公司的雇员,也是1993年诺贝尔化学奖的获得者,它是一种简单,...
PCR
原理是什么
答:
PCR
原理:DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本
反应
...
PCR反应
原理是什么?
答:
PCR(聚合酶链式反应,Polymerase Chain Reaction)是一种常用的分子生物学技术,其目的是在体外复制特定的DNA片段,从而使之数量显著增加。
PCR反应
的原理可以分为以下几个步骤:初始化(Denaturation):PCR反应的第一步通常在较高的温度下进行(通常约94-95°C),在这个温度下,双链DNA会解链成为两条...
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