44问答网
所有问题
当前搜索:
t4dna连接酶为什么效率低
T4DNA连接酶为什么
连接平末端的
效率
比较低
答:
因为黏性末端的碱基是互补的,在连接时,黏性末端可以通过碱基互补配对,加快
DNA连接酶
的连接速度,而平末端则不能。
影响
dna连接效率
的因素有哪些
答:
1、反应温度 温度是影响
DNA连接效率
的主要因素。
连接酶
的最佳反应温度是37℃,但是在这个温度下,粘性末端之间退火形成的氢键结合是不稳定的。因此,连接粘性末端的最适温度一般认为4~16℃比较合适。平末端连接反应受温度的影响较小,连接反应的最适温度为10~20℃,一般可在室温下进行,但温度过高(>30...
T4
噬菌体
DNA连接酶
是
什么
答:
T4DNA连接酶,来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低
。噬菌体T4DNA连接酶分子是一条多肽链,分子量为60Ku,其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA,DNA-RNA,RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。
为什么
黏性末端能够通过互补碱基间的配对重新结合??而具有平末端的
DNA
...
答:
平末端和粘性末端的链接都需要连接酶催化的,脱水缩合重新形成磷酸二酯键。其中E.coli DNA连接酶只识别催化粘性末端,
效率
较高,而
T4 DNA连接酶
既可以催化粘性末端,也可以催化平末端,效率相对较低。其次,在实际应用,平末端的链接具有较大的随机性,而粘性末端由于碱基互补,其连接具有一定得特异性。在...
如何提高
DNA
平端
连接
的
效率
答:
DNA连接酶来缝合,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。E·coliDNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来,不能将双链DNA片段平末端之间进行连接。而
T4DNA连接酶
既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端,又可以“缝合”双链DNA片段的平末端,但连接平末端之间的
效率
比较低。
...回答下列问题:(1)限制性内切酶切割
DNA
分子后产生的片段,其末端类型...
答:
即平末端和黏性末端.(2)为了便于相连,两种不同限制酶切割之后所产生的黏性末端必须相同.(3)DNA连接酶分为两类:E.coliDNA连接酶和
T4DNA连接酶
.这二者都能连接黏性末端,此外T4DNA连接酶还可以连接平末端,但连接平末端时的
效率
比较低.(4)反转录是以mRNA为模板逆转录先合成单链DNA,...
在有t4聚合酶的存在下
t4连接酶
还能将目的基因连到载体上吗
答:
目前已知有三种方法可以用来在体外
连接DNA
片段:第一种方法是,用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段;(人教版高中生物选修3中提到的E·coliDNA连接酶,来源于大肠杆菌,可用于连接粘性末端;
T4DNA连接酶
,来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接
效率低
。) 第二种方法是,用T4DNA...
E.coli连接酶与
T4连接酶
的区别
答:
E.coli只
连接
粘性末端
T4
可以连接平末端和粘性末端
限制性内切酶可以
连接DNA
的末端吗?
答:
再用
T4DNA连接酶
连接,但平末端连接要比粘性末端连接的
效率低
得多。在分子生物学的研究中,DNA末端的连接是一极为常用的基本操作,可分为粘末端和平末端连接,粘末端
连接效率
相对较高,平末端的连接效率一般非常低, 但平末端连接具有普适性,被广泛地用于将外源DNA片段的相互连接当中。
DNA
分子的
连接
方法有哪些?
答:
然后用
T4 DNA连接酶
将不同片段连接起来。该法形成重组DNA分子的
效率低
,只及粘性末端法的1%。2、人工接头法,1976年发展起来的。首先用化学法合成具有某种限制性内切酶识别位点的序列,通过T4 DNA连接酶的作用连接到两种待连接片段的平末端上,然后用这种限制性内切酶处理产生粘性末端,实现体外重组。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
其他人还搜
T4DNA连接酶37℃连多久
t4dna连接酶连接什么末端效率低
t4dna和ecoli谁快
t4dna连接酶可缝合什么末端
DNA连接效率不高有哪些原因
t4连接酶加多了
T4DNA连接酶的作用
t4连接酶37度可以吗
连接黏性末端和平末端的酶