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t4dna连接酶连接什么末端
想知道E·coli
DNA连接酶
为
什么
不能连接平
末端
答:
EcoRI限制酶能识别GAATTC序列,并在G-A之间切割产生黏性
末端
;AluⅠ限制酶能识别AGCT序列并在G-C之间切割产生平口末端。E·coliDNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来,不能连接平末端,
T4DNA连接酶
既可以连接黏性末端,又可以连接平末端,但连接平末端的效率较低。看到了吗 问题其实就...
平
末端
的
DNA
片段可与其他任何具有平末端的片断相连么? 比如说…AC是不...
答:
和平
末端
对应的概念是黏性性末端,黏性末端相连必须要满足碱基互补的原则 而平末端则不需要,因为2条链是一般长,所以只需要用
DNA连接酶连接
即可
Illumina测序原理
答:
DNA
文库的特点 :如何制作DNA文库:基因组DNA用超声波打断(也可以用通过酶切的方法)获得短的DNA片段,其粘性
末端
使用
T4
-DNA聚合酶补成平末端,然后用klenow酶在3'端加上polyA碱基(方便接头嫁接到DNA片段),最后,
连接酶
将特定的接头连接上去。连接好接头的DNA片段混合物,我们称为文库。1)文库片段...
基因工程与PCR技术的异同点
答:
(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段
末端
通常有两种形式:黏性末端和平末端。2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E.coliDNA连接酶和
T4DNA连接酶
)...
DNA
聚合酶与
连接酶
的区别?
答:
这表明该酶与DNA复制关系不大,而在DNA修复中起着重要的作用。DNA连接酶主要用于基因工程,将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性
末端
重新组合,故也称“基因针,DNA连接线”。人教版高中生物选修3中提到的E·coliDNA连接酶,来源于大肠杆菌,可用于连接粘性末端;
T4DNA连接酶
,来源于T4噬菌体,可用于连接...
一个有关
酶
的问题
答:
这在DNA复制、修复和重组中起着重要的作用,连接酶有缺陷的突变株不能进行DNA复制、修复和重组。噬菌体
T4DNA连接酶
分子也是一条多肽链,分子量为60KD,其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可
连接DNA
-DNA,DNA-RNA,RNA-RNA和双链DNA粘性
末端
或平头...
如何理解
DNA连接酶
的作用特点
答:
然而,在基因工程的实际操作中,催化DNA片段
末端连接
的方法是非常灵活的。例如,当目的序列和载体上没有相同的 限制性内切酶 位点可供利用时,而用不同的限制性内切酶切割后的黏性末端不能互补结合,则可用适当的酶将DNA突出的末端削平或补齐成平末端,再用
T4DNA连接酶连接
,但平末端连接要比黏性末端连接...
DNA连接酶
把目的基因与运载体黏性
末端
的碱基对连接起来
答:
不是连接碱基对,而是一个五碳糖和一个磷酸之间形成磷酸二脂键,碱基对互相之间形成氢键,与
DNA连接酶
无关。
为
什么
平端
连接
效率比黏端连接要低?
答:
楼上的不懂不要瞎说,误导人家。这两种连接键都是磷酸二酯键,没有区别的。连接效率之所以比较低,原因之一是在连接过程中只有
连接酶
的作用,缺乏粘性
末端
那样突出碱基的互补作用;原因之二是常用的
T4DNA
ligase对于平末端的Km值比粘性末端高1000倍 ,Km值越大,酶与底物亲和力越小....
为什么Ecoli
DNA连接酶
只能连接黏性
末端
,而
T4
既可以连接黏性末端又可以...
答:
这是不同
酶
的属性,对于其原因,佛曰:不可说,不可说
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