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两种大小相同的蛋白纯化
胞外
蛋白
酶的分离
纯化
、理化特性及其基因克隆
答:
近年来,从木霉菌中分离到多种胞外蛋白酶,多为丝氨酸蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶(表10.12)。蛋白酶分子量范围为21~45kDa,
大小
不等。不同木霉菌株可以产生分子量、氨基酸序列和核酸序列类似
的蛋白
酶。Geremia等(1993)从黄绿木霉中分离
纯化
到1个与枯草杆菌素类似的碱性丝氨酸蛋白酶PRB1,类似的蛋白...
请教一道关于
两种蛋白质
鉴定的题
答:
1. 针对目标蛋白制作抗体,western杂交验证,如果小分子量
的蛋白
也能够杂交出条带,则可能是目标蛋白部分降解的产物。2. 对目标蛋白和小分子量的蛋白采用同一种内切蛋白酶进行消化,然后电泳分析肽谱是否存在一致的条带。3. 也可以对
两个蛋白
分别进行末端测序,分析序列是否存在一致。
β-葡聚糖酶
纯化
、性质及编码基因
答:
从哈茨木霉CECT2413 中克隆到
两个
葡聚糖酶基因;一个是内切β-1,3葡聚糖酶,基因编码
的蛋白质大小
为78kDa(表10.2);另一个是内切β-1,6葡聚糖酶,基因编码的蛋白质大小为43kDa。β-1,3葡聚糖酶基因的克隆表明了木霉菌株CECT2413主要具有β-1,3葡聚糖酶活性。该基因的克隆通过检测
纯化蛋白
的氨基酸序列得到。
分离
纯化
基因工程药物常用的色谱方法有那些?它们的原理是什么?_百度...
答:
【答案】:分离
纯化
基因工程药物常用的色谱方法有:离子交换色谱,疏水色谱,亲和色谱和凝胶过滤色谱;离子交换色谱,以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子和交换剂 上的平衡离子进行可拟交换时的结合力
大小的
差别而进行分离的一种色谱方法;疏水色谱,利用
蛋白质
表面的疏水区域与固定相上疏水性基团...
免疫胶体金技术
的蛋白
制备
答:
胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近
蛋白质
的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的
大小
、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。1.待标记蛋白溶液的制备 将待标记蛋白预先...
生物分离高手进
答:
再用适宜的洗脱剂将该
蛋白质
洗脱下来,洗脱液用于进一步的分离
纯化
。4.泡沫分离原理:将气体通入含多种组分的溶液中,由于这些组分的表面活性由差异,因此在溶液的表面,某些组分将形成泡沫,泡沫的稳定性取决于操作条件及溶液的生物学特性。泡沫中含有更多的表面活性成分,故泡沫的组分种类及其含量与溶液中的不
相同
。这样,...
说明双向电泳分离
蛋白质
技术的原理以及其在蛋白组学研究中的意义。
答:
具不同等电点
的蛋白
会电泳到和其等电点一致的位置;第二IEF进行SDS-PAGE,胶条上的蛋白根据其分子量
大小
进一步分离。通过这2维分离过程,不同属性的蛋白得以分离。意义,研究蛋白的理化性质如等电点和分子量,蛋白的分离
纯化
,蛋白表达差异的查找,结合质谱可以对特定蛋白进行鉴定。
蛋白质
变性后为什么也可以用双缩脲试剂检验?
答:
双缩脲反应是具有
两个
或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应,生成红紫色的络合物。由于
蛋白质
分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,也能发生双缩脲反应,因此,蛋白质中的双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)结构在碱性溶液(NaOH)中与硫酸铜溶液中的Cu2+作用,发生颜色反应形成紫色的络合物。所以双...
凝胶色谱法分离
蛋白质
原理
答:
凝胶色谱法分离
蛋白质
原理:大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布颗粒之间,所以在洗脱时向下移动的速度较快。小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶相内,在向下移动的过程中,从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒,如此不...
请问多肽链中氨基酸序列分析主要特点是什么
答:
1�
纯化蛋白
质:用于序列分析
的蛋白
质应是分子
大小
均一,电游呈现一条带具有一定纯度的样品。 2�分析蛋白质的氨基酸组成:用酸、碱等将蛋白质肽链水解为游离氨基酸,再用电泳、层析等方法分离、鉴定所有游离氨基酸的种类和含量,现在可用氨基酸自动分析仪来快速测定。 3.测定肽链中N末端...
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