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琼脂糖凝胶电泳上样缓冲液
聚丙烯酰胺凝胶电泳与
琼脂糖凝胶电泳
的区别
答:
一、支持介质不同 1、聚丙烯酰胺凝胶电泳:是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术 2、
琼脂糖凝胶电泳
:是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法 二、用途不同 1、聚丙烯酰胺凝胶电泳:用于分离蛋白质和寡核苷酸 2、琼脂糖凝胶电泳:用于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等 三、优势不...
琼脂糖凝胶电泳
做好的胶多长时间内跑样都可以?
答:
放在
电泳缓冲液
里48小时没有问题。
用
琼脂糖凝胶电泳
分析核酸(DNA和RNA)有哪些影响因素?
答:
4 结果分析 较成功的电泳结果是分子量标准条带整齐清晰,样品条带也整齐清晰,如果条带模糊暗淡,单从
琼脂糖凝胶电泳
角度来说,可能的原因:溴化乙锭的质和量怎样?溴化乙锭见光易分解,母液配制时间过长或保存不当(一般4℃ 避光保存一年内有效),或者终浓度没达到0.5 vg/ml;电泳槽中
缓冲液
使用次数...
DNA的
琼脂糖凝胶电泳
的应用和发展举例。要详细一点的。谢谢了。很急啊...
答:
然后在1.0%的
琼脂糖凝胶
上进行
电泳
,以1kb DNA ladder 为参照,估计DNA溶液浓度。具体检验方法是:2.0%琼脂糖制成凝胶,取6 微升 AFLP—PCR产物与1微升
上样缓冲液
混匀后上样,用1×TBE电泳缓冲液,120V电泳50min,使用EB溶液染色后在凝胶成像系统(ChampGel-3200)上观察拍照[4]。2、琼脂糖在其他...
电泳缓冲液
的作用?
答:
TAE的缺点是缓冲容量小,长时间
电泳
(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的
缓冲液
得到交换。TBE的特点是缓冲能力强,长时间电泳时可选用TBE,并且当用于电泳小于1kb的片段时分离效果更好。TBE用于
琼脂糖凝胶
时易造成高电渗作用,并且因与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物而使DNA片段...
DNA酶切及
凝胶电泳
的操作步骤
答:
1、 取5×TBE
缓冲液
20ml加水至200ml,配制成0.5×TBE稀释缓冲液,待用。2、 胶液的制备:称取0.4g琼脂糖,置于200ml锥形瓶中,加入50ml 0.5×TBE稀释缓冲液,放入微波炉里(或电炉上)加热至琼脂糖全部熔化,取出摇匀,此为0.8%
琼脂糖凝胶
液。加热过程中要不时摇动,使附于瓶壁上的琼脂糖颗粒进入溶...
DNA的限制性酶切及
电泳
分析实验方法.
答:
2. 37 ℃水浴1 h。3. 将Eppendorf管置65 ℃水浴中10 min,通过加热使酶失活以终止反应。4. 12000 rpm离心5 sec,将管盖及管壁上的水离下。5. 取10 μl消化产物,与2 μl 6×
上样缓冲液
混匀,
琼脂糖凝胶电泳
检测消化效果,电泳条件:约100 V 30~60 min。6 结果观察。操作注意事项:1...
DNA
琼脂糖凝胶电泳
出现拖尾是什么原因?
答:
对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度.④增加模板量,减少引物的用量 ,减少循环次数,提高退火温度.2、
电泳
体系的问题:(1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液.(2)上样时样品漂了,建议增加
上样缓冲液
的用量,以及小心加样.(3)电压太高.(4...
变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和
琼脂糖凝胶电泳
的
上样缓冲液
一样不?
答:
不一样,两者有一部分成份是相同的,如指示剂溴酚蓝,和增加比重的蔗糖。对于SDS-PAGE的缓冲液,它还含有一定比例的SDS和强还原剂(巯基乙醇或者DTT),因为SDS-PAGE中蛋白与SDS结合变性是通过
上样缓冲液
反应完成的。
琼脂糖凝胶电泳
分离核酸分子的实验步骤大体有哪几步
答:
第三是点胶。把凝好的胶取出来放在有与制胶同浓度TBE
缓冲液
的
电泳
槽中,取每1微升Loading Dye(一种沉淀剂,使点胶后样品沉到胶孔底部不浮上来)混匀5微升的核酸样品。四是电泳啦!电压电流和事件看你的样品而定吧,一般这种小胶我们是用110V、400mA跑25min就可以了。最后当然就是在紫外
凝胶
成像...
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