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逆转录需要引物吗
分不清反
转录
和反转录PCR,希望能人帮我解释一下
答:
其原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机
引物
利用
逆转录
酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于:分析基因的转录产物、获取目的...
我想问什么是反
转录
PCR?
答:
反
转录
PCR就是把RNA提取后反转录成cDNA,并以其为模板进行的PCR反应,通常用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平 巢式PCR(nested PCR),是指利用两套PCR
引物
(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应。在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。由于巢...
提取RNA之后做体外
逆转录
cDNA
需要
能量吗,如果需要,那么能量从哪来的...
答:
逆转录
体系跟普通的PCR体系类似,都是dNTP,模板,
引物
和酶,如果说能量应该是有dNTP水解提供,以为他本身就是一种三磷酸腺苷,可以供能。
rna反转录与
逆转录
的区别
答:
由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“
逆转录
”,由依赖RNA的DNA聚合酶(逆转录酶)来完成。随后,DNA的另一条链通过脱氧核苷酸
引物
和依赖DNA的DNA聚合酶完成,随每个循环倍增,即通常的PCR。原先的RNA模板被RNA酶 H降解,留下互补DNA。在细胞内转录的叫逆转录细胞外的叫反转录 ...
逆转录
PCR
引物
,在PUBMED上搜文献上找了一个引物,BLAST了一下,结果...
答:
Tm值太高了。只是
逆转录
的话,只要能逆转录出来,再用pcr扩就好了,特异性不用太讲究。
transcription
转录
答:
在转录过程中,RNA聚合酶负责合成RNA,但其工作方式独特,无需
引物
,但不具备校正错误的功能,这意味着可能会产生少量的错误RNA,这些错误可能影响后续的蛋白质合成。在反转录病毒感染中,转录同样扮演重要角色,因为病毒
需要
将自身的遗传物质转化为宿主细胞可识别的形式,这一过程涉及
逆转录
酶,将病毒RNA逆...
用茎环
引物逆转录
miRNA,茎环引物的浓度是多少
答:
实际上不
需要
Primer Plus,手工设计足够了,因为需要设计的只有6个碱基而已. 首先,为你的miRNA 3'-端最后6个碱基写一段完全互补的序列,然后接在一段固定的茎环结构模板序列上,就完成了. 比如: hsa-miR-10a:5'- UACCCUGUAGAUCCGAAuuugug -3' 设计的
引物
就是:GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCA...
引物
酶是
逆转录
酶吗
答:
引物
酶(Primase) ,用来引导RNA引物/引子(RNA primer)的合成,从而引导DNA聚合酶介导的DNA链的合成。引物酶需引发前体护送才能催化引物合成。
逆转录
酶又称RNA指导的DNA聚合酶。是以RNA为模板合成DNA的酶。这种酶是1970年美国科学家特明(H.M.Temin)和巴尔的摩(D.Baltimore)分别于动物致癌RNA病毒中发现...
随机
引物
之RT-PCR急急急急急!!!
答:
就是使用许多随机的碱基组合的
引物
(随机组合丰富),一般6到8个碱基,许多随机引物组成的一套引物组,由于mRNA相对较长,随即引物与它结合的位点较多,从而很快反
转录
形成cDNA单链。
反
转录
的
引物
和qPCR的引物是一样的吗?
答:
我觉得是的。
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