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逆转录需要引物吗
逆转录
酶有校对功能吗?合成DNA时的
引物
是DNA吗?
答:
合成DNA时的
引物
不是DNA,转录是DNA合成RNA,
逆转录
就是RNA合成DNA.引物当然是RNA。
请问RT-PCR的主要过程是什么?稍微详细点 谢谢~~
答:
不晓得你说的是RT-PCR(reverse transcription PCR)呢,还是实时PCR(real-time PCR)。如果是反
转录
的话,步骤如下:1.电泳定量RNA或直接测定RNA浓度。2.反转录体系:(20 μl)RNA+DEPC 水: 11μl, RNA量1-5μg Oligo dT: 1μl 5X RTase Buffer: 4μl (10X RTase Buffer 2μl + 2μl...
反向PCR,重组PCR,原位PCR有什么区别?
答:
不是很详细,看看可以么 1.
逆转录
PCR(RT-PCR)用来扩增RNA的方法。2.竞争逆转录PCR(competitive reverse transcription-polymerase chain rection C-RT-PCR)低丰度RNA定量的好方法。3.多重PCR(multiples PCR)在同一PCR体系中加入多对
引物
可用于基天长度很长,发生多处缺失的???4.多种PCR可同时加入...
DNA复制的几个问题,请学生物专业的回答!
答:
2:第一它没有额外的引物,DNA聚合酶必须
要引物
。第二DNA聚合酶都是从5--3的方向聚合的,因此最后切除的5端得引物没有办法填补。这是就需要端粒酶来完成:端粒酶是一种
逆转录
酶,它有RNA指导的DNA聚合酶活力。3:因为这时是填补,上下都是有DNA片段的。参考资料:王景岩的生物化学&翟中和的细胞生物...
...表达理解这一块内容中,RNA病毒是吧必须要
逆转录
形成
答:
双链RNA病毒:呼肠孤病毒的分段双链RNA基因组的每个节段编码一种mRNA,mRNA的合成是在部分脱壳的颗粒中利用毒粒携带的转录酶转录基因组的负链完成。二倍体正链RNA病毒:
逆转录
病毒的+RNA基因组由毒粒携带的逆转录酶以细胞的tRNA为
引物
,逆转录产生-DNA,形成RNA-DNA杂交体。然后+RNA被逆转录酶的RNaseH...
自驾送孩子上大学驾驶员需核酸检测吗
答:
1、核酸提取使用硅胶柱离心、磁性硅胶颗粒分离方法以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防止RNA降解。DNA应置于-20℃保存,RNA和需长期保存的DNA应置于-80℃保存。2、逆转录合成cDNA。逆转录cDNA合成反应需使用
逆转录引物
、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量无...
提取RNA时热击前忘记加随机
引物
了,大约一分钟后想起来再加还来得及么...
答:
随机引物是指当特定mRNA由于含有使
逆转录
酶终止的序列而难于拷贝其全长序列时,可采用随机六聚体这一不特异的引物来拷贝全长mRNA。用此种方法时,体系中所有RNA分子全部充当了cDNA第一链模板,PCR引物在扩增过程中所
需要
的特异性.通常用此引物合成的cDNA中96%来源于rRNA。你确定提取RNA要加随机
引物吗
?
各位好啊:刚接触PCR不久,请教: 1、在RNA
逆转录
获cDNA 步骤中,应用Oligo...
答:
1、理论上所有表达出来的mRNA都能够被转录成cDNA,所以合成的cDNA含有目的基因和内参基因。获得的cDNA 是不是扩增的总RNA的全长,要看究竟有多长,一般2kb左右能得到全长,由于
逆转录
酶效率的原因,太长的只能得到3‘末端。2、是的,因为PCR是以DNA为模板,要先逆转录使mRNA转成cDNA. 至于“第一步...
逆转录
两次的cdna能用吗
答:
能。
逆转录
两次的cDNA能用在于其反应机制,逆转录酶可以催化
引物
延伸合成cDNA,且cDNA可以通过逆转录反应重复进行合成,因此被称为循环逆转录,这使得逆转录两次的cDNA可以反复进行合成,提高产量。
rt pcr的扩增检测
需要
首先经过什么过程后才能进行pcr循环?
答:
1、PCR
引物
设计 PCR反应中有两条引物,即5′端引物和3′引物。设计引物时以一条DNA单链为基准(常以信息链为基准),5′端引物与位于待扩增片段5′端上的一小段DNA序列相同;3′端引物与位于待扩增片段3′端的一小段DNA序列互补。引物设计的基本原则:引物长度:15-30bp,常用为20bp左右。引物...
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