高效液相色谱仪测定分析要用哪些公式和参数？

Question

主要就是从色谱图中得到“参数”用“公式计算”出来，最好有例子，急用，非常感谢！！！！！

Answer 1

色谱图 最主要的几个参数：保留时间 峰面积 分离度 拖尾因子 理论塔板数前面两个（保留时间Rt，峰面积A）可以直接得到；分离度（resolution）：表示两个相邻色谱峰的分离程度。计算公式：R=2(Rt2-Rt1)/(W1+W2)Rt1 Rt2 分别表示 峰1 峰2 的保留时间，W1 W2 分别表示 两峰的底峰宽，分离度R≥1.5 表示两峰完全分开。拖尾因子：表示色谱峰的对称程度 T(拖尾因子)=W0.05h/2d1 W0.05h为5%峰高处的峰宽，d1为峰顶点至峰前沿之间的距离《中国药典》规定峰高法定量时T应该在0.95-1.05之间，低于0.95为前延峰，高于1.05为拖尾峰。 理论塔板数（theoretical plate number），用于定量表示色谱柱的分离效率理论塔板数=5.54*(Rt/W0.5)^2 Rt 为保留时间 W0.5为半峰宽也可以表示为：N=16*(t/w )^2。其中，t是溶质从进样到最大洗脱峰出现的时间，w为该溶质的洗脱峰在基线处的宽度。

Answer 2

1.制标准溶液，利用不同浓度与峰面积的线性关系求出浓度与峰面积的线性范围，以确定实验所用浓度的范围。这里有用到回归方程。EXCEL上可处理。2.精密度，稳定性，重现性，回收率测定用到RSD相对标准偏差的公式即标准差/均数。3.样品含量测定用到外标法4.整个实验的进行，主要是找到合适的流动相，找对了比例就好做了，祝你实验顺利。更清楚的可参考分析化学中的仪器分析。