怎么单酶切，单酶切后怎么把目的基因连到已经酶切过的载体上如何防止自连

关键是如何防止自连怎么样做链接效率会高一些

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推荐答案 2013-03-14

　　单酶切要想防止自连，最好的办法是把载体酶切产物脱磷酸。脱了磷酸的载体就无法自连，它只能和目的片段连接。
　　如果不想脱磷，可以在连接反应体系中加大目的片段的数量，提高阳性克隆的比例，但这不能完全避免自连。
　　不过最好的办法还是做双酶切。单酶切连接实在麻烦。

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第1个回答 2013-03-14

这个你单酶切最好是要过夜，而且跑电泳尽量时间长一些，如果有一条带，就说明差不多完全切开了，如果害怕不安全，可以把这条带切胶回收纯化，用纯化后的连接，自连的可能性会小一些本回答被提问者采纳

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