牛奶中酪蛋白的分离纯化

如题所述

牛奶中酪蛋白的分离纯化如下:

1、原理

酪蛋白是牛奶的主要蛋白,其浓度约在3.5g/100m牛奶左右。实际上蛋白是一类含磷蛋白质的复杂混合物,而不是单一的化合物。酪蛋白的等电点大约在4.8,且不溶于乙醇。利用这两点性质将酪蛋白与其它蛋白质分开,并除去不必要的脂质。

2、操作方法

取牛乳100ml置500mL烧怀中,加热到40C,边搅边慢慢加100m预热的(40C)醋酸缓冲液,直到H达到4.8左右,用酸度计检验并调节之。将液冷却到室温,静止。

5分钟后用纱布过滤,收集沉淀。用少量水将沉淀沈涤几次,再浮于30mL乙醇巾,用布氏漏斗滤去乙醇溶液,再倒人乙醇一乙献混合液洗涤两次,最后用乙献洗涤沉淀两次,抽下。将沉淀铺在表面皿上除去Z醚,称重。此即干燥的酪蛋白纯品。

酪蛋白介绍:

酪蛋白是一种含磷钙的结合蛋白,对酸敏感,pH较低时会沉淀。酪蛋白是哺乳动物包括母牛,羊和人奶中的主要蛋白质,又称:干酪素、酪朊、乳酪素。

α-酪蛋白是哺乳动物的主要蛋白,人乳中没有α-酪蛋白,以β-酪蛋白为主要酪蛋白形式。酪蛋白对幼儿既是氨基酸的来源,也是钙和磷的来源,酪蛋白在胃中形成凝乳以便消化。

物化性质:

干酪素是等电点为pH4.8的两性蛋白质。在牛奶中以磷酸二钙、磷酸三钙或两者的复合物形式存在,构造极为复杂,直到现在没有完全确定的分子式,分子量大约为57000-375000。干酪素在牛奶中约含3%,约占牛奶蛋白质的80%。

纯干酪素为白色、无味、无臭的粒状固体。相对密度约1.26。不溶于水和有机溶剂。干酪素能吸收水分,浸于水中,则迅速膨胀,但分子并不结合。

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