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在DNA重组克隆实验中为什么通常使用T4DNA连接酶
如题所述
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推荐答案 2016-09-22
DNA重组（DNA recombination）指
DNA分子
内或分子间发生的遗传信息的重新共价组合过程。包括同源重组、特异位点重组和转座重组等类型，广泛存在于各类生物。体外通过人工DNA重组可获得重组体DNA，是
基因工程
中的关键步骤。
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为什么
E. coli
DNA连接酶
可以
连接DNA
?
答：
1、作用不同
E.coliDNA 连接酶是生物体内重要的酶，其所催化的反应在DNA 的复制和修复过程中起着重要的作用。T4-DNA连接酶即T4 DNA连接酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。2、
连接条件不同
用DNA连接酶连接具有互补...
T4DNA连接酶
的作用机制
答：
T4DNA连接酶作用机制：分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶，
因该酶在正常条件下，即能完成连接反应
。T4 DNA 连接酶是一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。λDNA用EcoRI酶切割后形成的6个片断均具有粘性末端（Cohesive ends），在T4 DN...
T4 DNA连接酶
是做
什么用
的?
答：
一、指代不同
1、E.coliDNA连接酶：从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。2、T4连接酶：一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。二、原理不同 1、E.coliDNA连接酶：一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小...
T4DNA连接酶
作用
答：
T4 DNA Ligase即T4 DNA连接酶，
可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合
，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
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