想做pcr，设计引物，如何查找目的基因？想要具体过程。主要是做lewis大鼠的组织。望高手指教~！！！谢谢！

如题所述

推荐答案 2011-10-17

NCBI nucleotide栏输入目的基因英文名称出来后，选择mus还是rat则是看你做小鼠还是大鼠，你是做大鼠当然是后者。
另外你是做DNA还是cDNA，如果是前者，点开就是了。如果是cDNA，要在点开的页面的左侧找出并点击CDs，这次出来的序列才是cDNA
一般是要提RNA，再逆转录成cDNA的，不知道你是不是直接提DNA，做PCR？追问

我做lewis大鼠，是选Rattus norvegicus吧？？我想测mRNA的表达。

追答

是的，你试一下了吗？

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第1个回答 2011-10-17

NCBI追问

有具体过程吗？

追答

你是要做real time检测还是扩增一段序列？序列就在NCBI上找引物设计用PP5之类的如果是个常见的目的基因可以去搜文献别人用的引物

相似回答

设计简单的引物;如何通过PCR获得目的基因答：PCR技术是扩增目的基因的方法。在这个过程中需要模板、原料、引物和酶等条件。包括三个阶段一、变性:加热到90-95度，目的基因两条链解旋二、复性:冷却到55-60度，引物结合到模板链上三、延伸:加热到70-75度，合成子链。

PCR的基本原理是什么?其基本流程如何?答：1、模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备。2、模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。3、引物的延伸：DNA...

引物设计,做PCR是,引物设计公司让我们给出引物的基因号,我不知道该怎么...答：基因号就是你要扩增的基因在GenBank上的登录号，在NCBI上搜索。引物好不好用就要看你用它能不能扩出你要的基因了~呵呵~~

想做实时定量PCR,怎么找内参基因,设计内参基因的引物?答：如果你的材料--芍药没有发表过内参基因的话，就得自己筛选了，这样就比较麻烦，首先就是要确定内参基因在你的比较组的各种情况下表达是稳定的。建议你再多查查文献，特别是国外的文献，已有发表的概率还是很大的。实在不行的话可以参见相近物种的内参基因 ...

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