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做PCR所要用到的缓冲液(含镁离子),这缓冲液指的是什么?谢谢!
如题所述
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推荐答案 2011-10-17
缓冲液有聚合酶需要的镁离子,还可以使反应体系处于酶反应时适合的PH,实际上就是给酶创造一个最适合的反应环境以使它的活性能达到最佳状态,如果你不加buffer,酶是没有活性的。一般酶和缓冲液是配套的,买酶的时候是在一起的
追问
这里指的缓冲液是否就是含镁离子的buffer?
追答
是啊,有的缓冲液是含镁离子的,有的不含镁离子,镁离子和buffer是单独的,买的时候自己选择
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其他回答
第1个回答 2019-12-05
就是给pcr提供的一个最适酶催反应条件。不同公司的buffer缓冲液都是不一样的,像离子浓度、ph等都有很大的差别。我们实验室用的是诺唯赞的pcr酶,上次我好奇打了他们的技术热线,大概都有些kcl、mgcl2、(nh4)2so4、tris-hcl等。
希望对你有帮助!
第2个回答 2011-10-17
缓冲液本身就是提供一个反应的环境,就像楼上所说的。mg2+是很多酶活性中心所必需的,pcr里的taq酶就需要它。如果是kod的体系,缓冲液就是和mg2+分开的,如果条带扩的不好,是可以通过提高mg2+浓度的,但是浓度太高,酶的活性太高就会扩出非特异性的条带。
第3个回答 2011-10-17
reaction buffer 10X的
相似回答
pcr
到底要不要加
镁离子,
纠结
答:
PCR反应需要加镁离子,并且镁离子浓度的总量应该比dNTPs的浓度高,常用1.5mmol/L
。镁离子是加在PCR反应的缓冲液中的,成分是最复杂的,除水外一般包括四个有效成分:1、缓冲体系,一般使用HEPES或MOPS缓冲体系;2、一价阳离子,一般采用钾离子,但在特殊情况下也可使用铵根离子;3、二价阳离子,即镁...
做PCR所要用到的缓冲液,这缓冲液指的是什么
答:
就是给PCR提供的一个最适酶催反应条件
。不同公司的buffer缓冲液都是不一样的,像离子浓度、PH等都有很大的差别。我们实验室用的是诺唯赞的PCR酶,上次我好奇打了他们的技术热线,大概都有些KCl、MgCl2、(NH4)2SO4、Tris-HCl等。希望对你有帮助!
t4buffer作用
答:
T4
缓冲液的
作用如下:1、提供酶反应所需的适宜pH值和离子强度:T4缓冲液的pH值和离子强度都能够提供一定的稳定性和适宜环境,有助于
PCR
反应的进行。2、保护DNA聚合酶的活性:T4缓冲液中含有一定的蛋白质,这些蛋白质能够保护DNA聚合酶的活性,减少其受到热变性的影响。3、提供足够的
镁离子
:T4缓冲液中...
在
pcr
实验中为
什么
加
缓冲液
答:
缓冲液
里有聚合酶
需要的镁离子,
还可以使反应体系处于酶适合的PH,所以要加,实际上就是给酶创造一个最适合的反应环境以使它的活性能达到最佳状态,如果你不加buffer,酶是没有活性的。
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