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在western blot中loading buffer的主要成分是什么?为什么有颜色呢?
最好能描述一下它是怎么包裹蛋白的
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推荐答案 2012-01-15
loading buffer
的主要成分是SDS,甘油,
溴酚蓝
,TRIS,其中甘油的作用是使样品沉到点样孔中而不漂浮起来,SDS是结合蛋白质,使所有蛋白质所带电荷性质一样,但不同分子量的蛋白结合的SDS数量是不一样的。溴酚蓝是指示剂,可以用来观察大概的电泳过程,因为它在不同浓度的胶中泳动的速率不一样,从而也可以看做是一个蛋白样品,这样就可以直观的大概了解蛋白泳动到了哪个位置,但是只能看一个大概
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其他回答
第1个回答 2012-01-04
loading buffer 的中文名字叫上样缓冲液,6*的缓冲液中可以显示两条带,前面SDS主要是促使聚合酶变性,因为没有除尽的聚合酶会结合在DNA双链上影响它的
追问
能回答的完整些吗?影响它的什么?
第2个回答 2012-01-07
包括SDS,巯基乙醇等。蛋白质解螺旋,变成线性,不是包裹蛋白。
相似回答
在western
blot中loading
buffer的主要成分是什么?为什么有颜色
答:
1、指示剂,方便观察电泳进行的程度;2、密度大,携带你的样本沉到孔的底部;3、保持蛋白线性及携带过量负电荷的状态。 除此之外,里面最重要的是还有巯基乙醇还原剂来让蛋白质充分变性,同时保护-SH基团。
western
blotting
的
过程和原理
答:
WesternBlot
原理、显色分类及操作步骤一、原理与Southern或Northern杂交方法类似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物...
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blot
详细步骤
答:
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blot
的
原理
是什么?
答:
细胞蛋白的提取则相对简洁,但同样需要准确的浓度测定,BCA 测定法在此大显身手,配合变性与
loading
buffer
,为蛋白的电泳之旅做好准备。电泳是
Western
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