保留值受哪些因素影响？

Question

色谱法中保留值的影响因素？

Answer 1

保留值受溶质分子结构、烷基键合固定相的特性、流动相性质影响。

1、溶质分子结构

在反相键合相色谱法中，溶质的分离以它们的疏水结构差异为依据的，溶质的极性越弱，疏水性也强，保留值越大。根据疏溶剂理论，溶质的保留值与其分子中非极性部分的总表面积有关，其与烷基键合固定相结出的面积愈大，保留值越大。

2、烷基键合固定相的特性

烷基键合固定相的作用在于提供非极性作用表面，因此键合到硅胶表面的烷基数量就决定着溶质容量因子的大小。烷基的疏水特性随碳链的加长而增加，溶质的保留值也随着烷基碳链长度的增加而增人。

随着烷基碳链的增长，增加了键合相的非极性作用的表面积，其不仅影响溶质的保留值，还影响色谱柱的选择性，即随烷基碳链的加长其对溶质分离的选择性也增大。

3、流动相性质

流动相的表面张力愈大，介电常数愈大，其极性越强，此时溶质与烷基键合相的缔合能力越强，流动相的洗脱强度弱，导致溶质的保留值越大。

扩展资料

保留值主要由固定相比表面积、键合相种类和浓度决定。

保留值通常随链长增长或键合相的疏水性增强而增大，对于非极性化合物通常遵循以下规则：(弱)非键合硅胶《氰基<C1(TMS)<C3<C4<苯基<C8≈C18(强)。

溶质保留值与固定相表面积成正比，普通载体(80A°)的比表面积约为250m²/g，而300A°孔径载体的比表面积约为60m²/g。

当其他条件相同时，溶质在300A°孔径(低表面积)色谱柱上的保留值大约为80A°孔径色谱柱上保留值的1/4(60：250)，小孔隙柱如高保留的C18柱或石墨柱有利于强亲水性样品洗脱。

样品的保留值也可以通过改变流动相组成或溶剂强度来调整，溶剂强度取决于有机溶剂的性质和其在流动相中的浓度。在反相色谱中，采用高溶剂强度、低极性的流动相时可获得较低的保留值。

固定相的不同也可以导致选择性发生变化，氰基柱、苯基柱、C8柱、C18柱等的选择性有很大差异，一般应优先考虑C8柱、C18柱，然后是氰基柱，再次是苯基柱。

参考资料来源：百度百科-反相高效液相色谱

参考资料来源：百度百科-反相色谱

Answer 2

1 死时间的影响：无论用相对保留值还是用保留指数来定性，都要涉及到调整保留时间（或调整保留体积）。要准确测定调整保留时间（或调整保留体积），就必须首先准确测定死时间（或死体积）。如果死时间（或死体积）测定不准，就得不到准确的调整保留时间（或调整保留体积），也就得不到准确的相对保留值和保留指数。在气相色谱中测定死时间（或死体积）时，通常用空气中的氮（N2）（在使用TCD检测器时）或甲烷（CH4）（在使用FID检测器时）作为惰性物质，认为它们没有保留，通过测定它们的保留时间，就可以得到死时间，再通过载气流速，就可以计算出死体积但实际上N2和CH4在固定液上都会有一定的溶解度。按文献报道，N2在角鲨烷固定液上的溶解度在100℃时为0.15mL/g,CH4在角鲨烷固定液上的分配系数在70℃时为0.16。因此，即使是用N2和CH4来测定死时间（或死体积），也都会产生一定的误差，特别是对一些保留值较小的化合物，在计算相对保留值或保留指数时引入的相对误差就较大了，从而影响了定性分析的准确度。在使用TCD检测器时，用N2(空气）测定死时间（死体积）基本可满足要求；而使用FID检测器时为了得到准确的，可重复的调整保留时间（或调整保留体积），就必须首先得到准确的、可重复的死时间（或死体积）。目前使用FID检测器时，求算准确的死时间的方法有两种，这两种方法都是基于同系物的碳原子数与其调整保留时间的对数成线性关系而推导出来的，
2. 载体吸附作用的影响：在气-液色谱中，假定载体是完全惰性的，但实际上载体还是有一定的吸附能力。由于载体不可能完全被固定液所覆盖，仍有极少量载体暴露在气相中，并对溶质有一定的吸附作用。不同的载体吸附能力不同，造成了同一溶质，同一固定液，用不同载体时的保留值有所不同。表2-2-1 和表"2-2-2 说明了具有不同吸附性能的载体，无论是涂非极性固定液（表2-2-1）还是涂极性固定液（表2-2-2），都会引起溶质保留值的变化。
由表2-2-1 可清楚地看出，在非极性固定液柱（角鲨烷柱）上，由于载体的吸附能力不同，溶质的保留指数亦不同，溶质保留指数随载体吸附能力的减小而降低，醇类保留指数比其他溶质的保留指数变化大，说明溶质和载体表面间的主要作用力是氢键力。由于载体在液固界面的吸附作用，故不宜用吸附性强的C—22 及Chromosorb P 载体配制非极性固定液柱来测定保留数据
3.进样量的影响：当载体的吸附作用可以忽略时，对称峰的保留值与进样量无关（图2-2-7中a），而非对称峰的保留值与进样量有关（图2-2-7 中b）。此时拖尾峰保留值随进样量增加而增加；伸舌峰保留值随进样量增加而减小。为了精确定义保留值，则需把进样量外延至零时的保留值作为标准，以消除进样量多少对保留值的影响当载体吸附作用不可忽略时，由于载体的吸附作用使进样量过小时保留值拖后，也影响保留值的准确测定，此时进样量要适当。在实际工作中可用实验方法寻求合适的进样量，具体方法是：将进样量由小逐渐增大，直至保留时间不再提前，保持恒定值，这就是排除了载体吸附作用的最小进样量，也是准确测定保留值的适宜进样量
4.载气纯度的影响：气中的水分和氧等杂质亦能影响保留值的准确测定。
（1）载气中水分对保留值的影响疏水性固定液的保留值不受载气中水分的影响，亲水性固定液（如聚乙二醇等）的保留值将会受载气中水分的影响，如表2-2-3 所示。极性强的亲水性溶质在被水汽沾污的聚乙二醇柱上的保留指数将增加，而疏水性溶质和正构烷烃标准物质由于分配系数变小，引起保留值变小。但是，由于溶质与标准物质的保留值是同时变小的，故相对保留值没有明显的变化。通入干燥载气去除固定液吸附的水分后，柱的保留特性可以恢复。
（2）载气中含氧量对保留值的影响由于氧对固定液的氧化作用改变了固定液的性质，所以，载气中含氧量高时，无论是非极性固定液柱还是极性固定液柱的保留值都会随时间的增加而有所改变。表2-2-4 . 给出了角鲨烷柱在100℃柱温下逐渐氧化而使柱子的保留指数变化的情况。表2-2-4 中除甲苯及1，2- 二溴乙烷的保留指数随氧化程度一直呈增加趋势外，其余化合物的保留指数都是先下降至最低值，然后再增大。保留指数降低时峰的对称性也有所改善，这是因为最初生成的氧化物钝化了载体表面的吸附中心，因此减少了它对溶质的吸附；而过量的氧化物基团又在固定液中起分配作用，因而表面极性增大，保留指数增加。涂有聚乙二醇和吐温固定液的柱子，当使用含氧量较高的氮气作为载气时，对极性化合物的分离能力会迅速下降，这是与聚乙二醇和吐温被氧化有关
5.固定液纯度的影响：由于生产固定液的厂家、原料、生产工艺和精制方法不同，故不同厂家生产的同一型号的固定液或同一厂家生产的不同批号固定液中的杂质含量往往不同，因而影响保留值的重复性。表2-2-5 , 给出三个不同厂家生产的聚乙二醇固定液在同样载体和同样操作条件下对不同化合物的保留指数，从中可以看出：同一型号的固定液，由于生产厂家不同，其保留指数有所差异。法国AEC公司，美国Shandon公司和北京化工厂生产的角鲨烷固定液也有类似的情况。因此，想得到重复性良好的保留数据就必须重视固定液的纯度
6. 其他操作参数的影响：除上述一些因素对保留值测定的准确性有影响外，其他色谱操作参数，如：载气流速的稳定性，柱温的稳定性，保留时间的测量方法的准确性等也会不同程度影响保留值测量的准确性。因此对这些操作参数要严格控制，控制越严格，这些参数的稳定性越好，保留值测定的准确性和重复性越好（由于保留值的真值无法得知，其结果的准确性和重复性只能以测定的精密度表示）。表2-2-6 给出了为了使保留值的测定达到不同精度要求时，一些操作参数稳定度应控制的范围本回答被提问者采纳

Answer 3

固定相和温度