买回的乳酸菌冻干粉菌种如何活化?想要用甘油继代保存在-80度冰箱里，又该如何保存？求详细步骤！

Question

如题所述

Answer 1

菌种以脱脂乳试管保存时，活化方法可直接用灭菌蜗卷铂耳环取之，转接入新鲜灭菌脱脂乳试管中即可。
菌种以冻干方式保藏时，首先用酒精棉将菌种管玻璃表面擦拭消毒，而后于酒精火焰处打开管口（事先用玻璃刀或小砂片割出刻痕），以灭菌铂耳环取之，转移入灭菌脱脂乳试管中。
将上述接种完毕的脱脂乳试管置恒温箱中，根据不同菌种的特性选择培养温度与时间。培养至凝固再移植到新的脱脂乳试管中，依此类推，传代几次至十几次，直至活力恢复为止。传代次数依菌种活力是否恢复而定，一般酸奶菌种43°C培养5-7hr或37oC过夜培养乳即凝固，表明其活力已恢复。注意每次活化之后均要涂片，Grams染色镜检，如菌种纯一旦活力恢复，即可投产使用；若污染杂菌，则必须采用乳酸菌培养基（如乳清培养基、蕃茄汁培养基等）重新分离培养、纯粹培养，镜检无杂菌才可使用。活化冻二菌种时，传代用的脱脂乳可添加0.5％葡萄糖与0.5％酵母膏，以加快乳菌活化速度.

Answer 2

如果您买回的是乳酸菌冻干粉菌种，活化的步骤如下：
1. 从冰箱中取出冻干的菌种，用小砂片或刀片将菌种管边缘的封口割开，打开管盖。
2. 用酒精棉擦拭菌种管的外表面，进行消毒。
3. 将灭菌铂耳环置于酒精灯火焰上烧热，然后用铂耳环取少许菌种粉末，接种到新鲜灭菌的脱脂乳试管中。
4. 将接种好的脱脂乳试管放入恒温箱中，根据不同的菌种选择培养温度和时间进行培养。一般酸奶菌种的温度为43℃，培养时间为5-7小时，或者在37℃过夜培养，观察乳是否凝固。
5. 待培养至凝固后，将菌种移植到新的脱脂乳试管中，重复以上步骤，一般传代2-3次，直至活力恢复后即可使用。
如果您想用甘油继代保存在-80℃冰箱中，可以按照以下步骤进行：
1. 准备甘油溶液，将甘油加入无菌水中，使浓度达到50%。
2. 从活化的菌种试管中取少量菌种，接种到甘油溶液试管中。
3. 将接种好的甘油溶液试管放入-80℃冰箱中保存。
需要注意的是，甘油保存的菌种一般适用于长期保存，并且在使用前需要重新活化。同时，操作过程中要确保无菌操作，以避免污染和交叉感染。