请教！！！用正置光学显微镜可以观察培养皿中的活细胞吗？我看文献都说用倒置的。用正置的是不适合还是？

Question

正置的显微镜是不能看，还是不适合看。我实验室有的就是正置的，单目的，用计算机来观察细胞。我是用来获取细胞图像，然后进行细胞识别

Answer 1

细胞在confocal皿中培养，细胞贴壁。因为培养皿中有培养液。如果用正置显微镜，镜头距离细胞较远，可能找不到细胞；要不镜头就得进入培养液中。所以用正置显微镜观察细胞不合适。当然如果你把培养液倒掉，那正置观察就没有问题了；或者用载玻片盖玻片封细胞都可以用正置来观察。
否则就要用倒置更合适一些了。

Answer 2

主要是工作距离的原因，你可以试一试，正置显微镜工作距离太短，观察起来很不方便，培养皿里如果有培养液那根本没法观察，如果只能用这个，就得把培养液吸干，只留少许，把物镜升上去，不加盖子放进培养皿，然后再观察。这个方法低倍镜还可以，如果是玻璃培养皿，底太厚了，高倍镜很难观察。这样做由于要去掉盖子，而且物镜离细胞层表面很近，一不小心就碰上了，很容易污染细胞，而且动作要快，不然那点培养液蒸发干了细胞就要挂了。倒置显微镜的光路是反的，聚光镜在上面，工作距离长，可以把整个培养皿或培养瓶放在上面观察，方便得多。本回答被网友采纳