一、区别
1、意义不同
do和does虽然都可以作为助动词原形，但does是do的第三人称单数形式，两者所指的人称不同。
2、主语搭配不同
do可以和表示第一人称（即表示“我”“我们”的英语单词）和第二人称（表示“你”“你们”的人称代词）的主语搭配，而does只能和表示第三人称单数的主语搭配，比如他（he）、她（she）以及它（it）搭配，若是第三人称复数的人称代词，则与do搭配使用。
3、单复搭配不同
do既可以与第一、二人称单数形式搭配，也可与第一、二、三人称的复数形式搭配，而does则只能与第三人称单数形式搭配。
二、用法
do和does都可以用作动词和助动词：
1、动词
作为实义动词（有实在意义的动词）都可以表示做，干等意思。
2、助动词
1）都可以构成一般疑问句；
2） 都可以构成否定句，如do + not ，does + not ；
3）构成否定祈使句；说明：构成否定祈使句只用do，不用did和does。
4）放在动词原形前，加强该动词的语气；
5）用于倒装句；
6）用作代动词。
"Does" 和 "do" 都是英语中的助动词，用来构成一般疑问句、否定句和一些其他特定语法结构。它们的区别在于它们在句子中的使用和与主语的一致性。
"Does" 用于第三人称单数主语（he、she、it）的一般疑问句和否定句中。
一般疑问句：Does she like coffee?（她喜欢咖啡吗？）
否定句：She does not like coffee.（她不喜欢咖啡。）
"Do" 用于第一人称、第二人称和第三人称复数主语（I、you、we、they）的一般疑问句和否定句中。
一般疑问句：Do you like coffee?（你喜欢咖啡吗？）
否定句：You do not like coffee.（你不喜欢咖啡。）
此外，"do" 在陈述句中也可以用作一个普通动词，表示进行或执行某个动作。
I do my homework every day.（我每天做作业。）
They do a great job.（他们工作得很出色。）