探索蛋白质世界的神秘链接,揭示生命机制的关键所在,科学家们依赖一系列精湛的方法来揭示蛋白质之间的相互作用。首先,让我们深入了解一下:
免疫共沉淀</:抗体的神奇力量在此展现,就像一把精准的探针,通过与目标蛋白的亲密接触,揭示出隐藏的互动网络。
免疫荧光共定位</:通过荧光标记的追踪,蛋白们的舞台被照亮,空间位置的揭示为理解它们的功能协作提供了关键线索。
Pull-down实验(如GST Pull-Down)</:体外的亲和舞蹈,融合蛋白的巧妙设计,如同一场精心设计的筛选游戏,让相互作用的蛋白在舞台上留下独特的印记。
接着,AP-MS(抗体亲和纯化-质谱)</登场,通过细致的步骤,包括裂解、孵育、清洗和检测,验证并筛选出那些紧密相连的蛋白伴侣。
双分子荧光互补(BiFC)</:荧光蛋白的巧妙融合,如同一场光的舞蹈,阴性对照的加入,使我们能准确解读蛋白间的相互影响。
NanoBiT</:萤火虫的灵感被赋予了现代科学,实时、定量地捕捉蛋白间的微妙互动,其可逆的标签设计提供了一种动态的视角。
FRET(荧光能量共振转移)</:深度洞察蛋白距离与动态变化,像一个精确的尺子,测量生命机制的精密运作。
然后,生物发光能量共振转移(BRET)</,一个无激发光、低背景的新星,通过荧光素酶的暗夜星光,为我们揭示蛋白世界中的隐秘互动。
最后,noLuc荧光素酶蛋白与Duolink实验</,如一颗璀璨的明珠,以其小分子、强光信号,以及PLA技术的精确度,让我们能直观地观察到蛋白表达与互作的强度,甚至在肉眼可见的尺度上放大千倍。