wb洗膜用tbs和tbst的区别

Question

如题所述

Answer 1

wb洗膜和tbst都是在western中用作洗膜的缓冲液，PSBT是磷酸盐缓冲液，TBST是Tris-Hcl缓冲液。wb洗膜和tbst差别主要在于PBST中由PBS加入了Tween20，Tween20是非离子型去污剂。

因为western中所用的膜可以与蛋白质结合，这样的话孵育过程中，抗体是能够与膜非特异性结合的，为了防止以后曝光造成胶片背景太高，在孵育抗体后，混有Tween2的PBS能够将非特异性结合的抗体洗掉，增加特异性。

在抗体的保存中，抗体往往是以极高浓度保存在甘油之中的，使用的时候按照一定的比例去稀释，TBST跟TBS都可以用来稀释抗体，以做孵育抗体之用，PBST跟PBS不清楚，有人用PBS稀释的，PBST没见过有人用过，其实按照道理来说是可以使用的。

westernblot的实验注意问题：

蛋白样品的提取及蛋白含量的检测，蛋白样品的提取咱们完全是按照试剂盒说明书来做的，步骤没有什么讲的，但是因为蛋白样品的好坏直接决定了是否能做出来蛋白条带，这就好比盖房子所需要的砖头一样，一定要务必认真。

Answer 2

WB洗膜是去除非特异性结合，增加表达的特异性，而tbs和tbst都可以用来洗膜，但是tbst中的t是tween20，是离子去污剂。