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PCR缓冲液中为什么加Mg
如题所述
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推荐答案 2018-08-11
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pcr
的
缓冲液中为什么
要有镁离子
答:
因为镁离子是TapDNA酶不可或缺的辅助因子
,镁离子对于稳定核苷酸和稳定扩增体系,提高tapDNA聚合酶的活性十分重要。镁离子浓度过低使酶活力降低,过高使酶催化非特异性扩增。镁离子是由镁原子失去最外层的两个电子得到的,书写为Mg²+。
pcr
到底要不要加镁离子,纠结
答:
4、辅助成分,常见的有DMSO、甘油等,主要用来保持酶的活性和帮助DNA解除缠绕结构。
缓冲液
的目的是提供合适的酸碱度与某些离子,而
PCR
反应五要素是:引物(PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液(其中需要Mg2+)。
氯化镁在
PCR中
的作用
答:
实际上是镁离子的作用
。镁离子是Polymerase的激活剂。浓度过高可降低PCR扩增的特异性,浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。
为什么PCR中加Mg
cl2溶液?它的作用是什么
答:
主要是
Mg
离子,Mg与dNTP以及DNA模板结合形成复合体,只有这种复合体才能被DNA聚合酶识别
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加样缓冲液
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