欢迎来到我的ATAC-seq实战教程,我是研究生小徐,今天将带领大家一步步从SRA数据下载到论文主图的绘制,以《植物杂志》2018年的一篇文章为例(GSE101940数据)。这个教程将详尽解释每个步骤,包括代码演示和关键截图,旨在帮助初学者理解ATAC-seq的全程。
首先,我们要分析拟南芥干细胞和叶肉细胞的ATAC-seq数据,为了保证环境一致性,我们将在独立的conda环境atac_test中操作。对于新手,我会特别强调软件安装的便捷工具,例如使用“软件管家”。环境创建和数据下载是基础,我们将在Windows上利用Linux子系统进行,具体如下:
后续章节将深入探讨数据转换为fastq格式,质量控制,以及通过fastp处理剪切序列,以确保数据质量。</
数据预处理完成后,我们继续探索数据回帖过程,即定位序列到参考基因组,使用bowtie2或bwa进行比对,生成.sam文件。在这个过程中,会遇到如序列长度异常的警示,需要仔细检查和处理。
图40展示了高质量数据的关键特征和可视化,包括1kb范围内的peak分布,揭示了转录起始位点附近的开放区域模式。</
最后,我们通过motif分析和ChIPseeker工具,如图41所示,来鉴定转录因子和motif富集,从而深入理解转录调控机制。教程结束,让我们共同见证数据分析的成功,期待与你分享更多ATAC-seq的精彩。</