DNAæåçå ç§æ¹æ³
(1).æµçæ³
å©ç¨RNPåDNPå¨çµè§£æº¶æ¶²ä¸
溶解度ä¸å,å°äºè
å离,常ç¨çæ¹æ³æ¯ç¨1M æ°¯ 纳æååé æ½æ,å¾å°çDNPç²æ¶²ä¸å«æå°éè¾éç
氯仿ä¸èµ·æè¡,使乳å,å离å¿é¤å»èç½è´¨,æ¤æ¶èç½è´¨åè¶åçå¨æ°´ç¸å氯仿ç¸ä¸é´,èDNAä½äºä¸å±æ°´ç¸ä¸,ç¨2åä½ç§¯95%
ä¹éå¯å°DNA é çæ²æ·åºæ¥.
ä¹å¯ç¨0.15 MNaCL液åå¤æ´æ¶¤ç»èç ´ç¢æ¶²é¤å»RNP,å以1MNaCLæåè±æ°§æ ¸ç³èç½,åæ氯仿---å¼éæ³é¤å»èç½.
两ç§æ¹æ³æ¯è¾,åç§æ¹æ³ä½¿
æ ¸é
¸é解å¯è½å°ä¸äº.
以ç¨çé
¸æº¶æ¶²æåDNA æ¶,å å
¥ééå»æ±¡å,å¦SDSå¯æå©äºèç½è´¨ä¸DNA çå离.å¨æåè¿ç¨ä¸ä¸ºæå¶ç»ç»ä¸çDNase对DNA çé解ä½ç¨,å¨
æ°¯åé 溶液ä¸å å
¥
æ 檬é
¸é ä½ä¸ºéå±ç¦»åççåå.é常ç¨.15MNaCL,0.015Mæ 檬é ,并称SSC溶液,æåDNA.
ï¼2ï¼.
é´ç¦»åå»æ±¡åæ³:
ç¨SDSæ
äºç²è¯é
¸é çå»æ±¡å使èç½è´¨åæ§,å¯ä»¥ç´æ¥ä»çç©ææä¸æåDNA .ç±äºç»èä¸DNAä¸èç½è´¨ä¹é´å¸¸åéçµå¼åæé
ä½é®ç»å,å 为é´ç¦»åå»æ±¡åè½å¤ç ´åè¿ç§ä»·é®,æ以常ç¨é´ç¦»åå»æ±¡åæåDNA.
ï¼3ï¼.è¯é
æ½ææ³:
è¯é
ä½ä¸ºèç½åæ§å,åæ¶æå¶äºDNaseçé解ä½ç¨.ç¨è¯é
å¤çåæµæ¶²æ¶,ç±äºèç½ä¸DNA èç»é®å·²æ,èç½åå表é¢åå«æå¾å¤ææ§åºå¢ä¸è¯é
ç¸ä¼¼ç¸æº¶.èç½åå溶äºé
ç¸,èDNA溶äºæ°´ç¸.离å¿åå±åååºæ°´å±,å¤æ¬¡éå¤æä½,åå并å«DNA çæ°´ç¸,å©ç¨æ ¸é
¸ä¸æº¶äºéçæ§è´¨,ç¨ä¹éæ²æ·DNA .æ¤æ¶DNAæ¯ååç²ç¨ çç©è´¨,å¯ç¨ç»ç漫漫ç»æä¸å¢,ååº.æ¤æ³çç¹ç¹æ¯ä½¿æåçDNAä¿æ天ç¶ç¶æ .
ï¼ 4ï¼.æ°´æ½ææ³:
å©ç¨æ ¸é
¸æº¶è§£äºæ°´çæ§è´¨,å°ç»ç»ç»èç ´ç¢å,ç¨ä½ç溶液é¤å»RNA,ç¶åå°æ²æ·æº¶äºæ°´ä¸,使DNAå
å溶解äºæ°´ä¸,离å¿åæ¶éä¸æ¸
液.å¨ä¸æ¸
ä¸å å
¥åºä½æ°¯åé è°èè³2.6M.å å
¥2åä½ç§¯95%ä¹é,ç«å³ç¨æ
ææ³æ
åº.ç¶ååå«ç¨66% ٠80%å95%ä¹é以åä¸éæ´æ¶¤,æåå¨ç©ºæ°ä¸å¹²ç¥,æ¢å¾DNAæ ·å.æ¤æ³æåçDNAä¸èç½è´¨å«éè¾é«,æ
ä¸è¬ä¸ç¨.为é¤èç½å¯å°æ¤æ³å 以æ¹è¯,å¨æåè¿ç¨ä¸å å
¥SDS.