已知基因片段如何扩增得到其全长及如何设计特异性引物？

Question

如题所述

Answer 1

最重要的是引物设计，首先要弄清楚你要扩增基因的大小，如果特别的长，那就需要做拼接PCR，再有就是要设计特异性好的引物以防止非特异的出现，对于这一点可以去NCBI做PRIMER BLAST。

Answer 2

可用PCR扩增，设计特异性引物可用NCBI的BLAST

Answer 3

设计特异性引物，然后走3'和5'RACE就行，至于怎么设计特异性引物，其实设计引物有许多原则，你可以到网上搜搜看，然后用设计引物的软件比如primer5等依据设计原则设计就行了。