44问答网
所有问题
单引物PCR与双引物PCR的原理及各自的应用?
如题所述
举报该问题
推荐答案 2012-07-14
一个引物就叫单引物 单引物指PCR中仅使用一条引物引发DNA聚合。有点是可以最大限度避免引物二聚体形成。但其应用也有局限性,即模板必须存在反向的两段退火区。
单引物PCR扩增的需求因素都非常的广,很容易扩增,但是我可以提出几个建议,因为我从单引物扩增做到了现在复合引物扩增,所以对这个有点经验吧,单引物扩增建议体系如下:
10 X PCR Buffer 2.5ul
25 mM/L Mg 1.5ul
2.5 mM/L dNTP 1.5ul
5 uM/L UpperPrimer 0.5ul
5 uM/L Lowerprimer 0.5ul
1U/ul Taq 1.0ul
Template(10ng/ul) 1.0ul
希望对你有些帮助!
上下游两个引物就是双引物,大部分的PCR都是用双引物
温馨提示:答案为网友推荐,仅供参考
当前网址:
http://44.wendadaohang.com/zd/V3ZDKGWR3.html
其他回答
第1个回答 2012-07-14
但
引物
只能是线性扩增,合成单链,应用 cDNA合成,探针合成等;
双引物可以指数扩增,合成双链,各种DNA片段的扩增、重组、突变等。
PS:模板存在反向互补区域是不能用单引物扩增的,因为链内退火会优于两条链间的退火
本回答被提问者和网友采纳
相似回答
单引物PCR
能扩增出
什么
答:
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物
。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板...
单引物与双引物
答:
单引物只能是线性扩增,合成单链,应用 cDNA合成,探针合成等
;双引物可以指数扩增,合成双链,各种DNA片段的扩增、重组、突变等。模板存在反向互补区域是不能用单引物扩增的,因为链内退火会优于两条链间的退火。
关于基因测序的几个问题!
答:
【原理】 ABI PRISM 310型基因分析仪(即DNA测序仪),采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳
,应用该公司专利的四色荧光染料标记的ddNTP(标记终止物法),因此通过单引物PCR测序反应,生成的PCR产物则是相差1个碱基的3'末端为4种不同荧光染料的单链DNA混合物,使得四种荧光染料的测序PCR产物可...
单引物PCR
对照
的原理
答:
所以做
单引物
对照,如果
跟双引物
结果一样,说明另一个引物没起作用,这肯定偏离你的实验设计 阴性对照是检测整个反应体系中是否存在核酸污染的。如果你没有加入模板,是不应该出现条带的;如果出现了,则说明反应体系中,酶、buffer、水等里面混有其它DNA,必须查明原因后更换试剂 ...
大家正在搜
PCR反应只用一条引物
引物结合模板的原理
引物加酶切位点的原理
随机引物法的原理
PCR引物的选择
引物原理
三引物法原理
大引物pcr诱变原理
引物合成原理
相关问题
PCR当中两个引物分别是怎么样的?具体详细的说一下。是怎么设...
什么是单引物PCR,有何优点?
如何去除单引物扩增(单引物扩增,基因,澹
细胞内DNA复制的引物与PCR引物有何区别?
引物是单链还是双链
PCR的原理是什么
PCR的原理
PCR技术基本原理