总皂苷照高效液相色谱法(附录ⅥD)测定对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Re对照品5mg,置5ml量瓶中,加甲醇适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。供试品溶液的制备精密称取本品约50mg,置25ml量瓶中,加甲醇适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。标准曲线的制备精密吸取对照品溶液20µl、40µl、80µl、120µl、160µl、200µl,分别置于具塞试管中,低温挥去溶剂,加入1%香草醛高氯酸试液0.5ml,置60℃恒温水浴上充分混匀后加热15分钟,立即用冰水冷却2分钟,加入77%硫酸溶液5ml,摇匀,以试剂作空白,消除气泡后照紫外-可见分光光度法(附录ⅤA)检测,在540nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,以浓度为横坐标,绘制标准曲线。测定法精密吸取供试品溶液50µl,照标准曲线的制备项下的方法,自“置于具塞试管中”起操作,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液的含量,计算结果乘以0.84即得。本品按干燥品计,含总皂苷以人参皂苷Re(C48H82O18)计,应为65%~85%。人参皂苷Rg1、Re、Rd照高效液相色谱法(附录ⅥD)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,以下表进行梯度洗脱;检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于3000。时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)0~30198130~3519→2481→7635~6024→4076→60对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1与人参皂苷Re和人参皂苷Rd对照品适量,加甲醇制成1ml中含人参皂苷Rg10.30mg,人参皂苷Re0.50mg和人参皂苷Rd0.20mg的混合溶液。供试品溶液的制备精密称取本品约30mg,置10ml量瓶中,加甲醇超声(功率250W,频率50kHz)溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。
测定法分别精密吸取上述对照品溶液20μl与供试品溶液5~20μl,注入液相色谱仪,测定,即得。本品按干燥品计算,含人参皂苷Rg1(C42H72O14),人参皂苷Re(C48H82O18),人参皂苷Rd(C48H82O18)的总量应为15%~25%。
总皂苷是从五加科植物人参的根、茎叶中提取精制而成,其富含十八种人参单体皂甙,溶于80°C的水,易溶解于乙醇。主要适用于冠心病、心绞痛、心率过缓、过快、室性早博、血压失调、神经衰弱、更年期综合症、疲劳过度、病后、产后、术后身体虚弱等症状;久服可以延年益寿,并能增强体力,治疗癌症患者因放疗和化疗引起的免疫功能低下等症;有抗冷热应激作用。同时具有增强人体表面细胞的活力,抑制衰老等作用。 实验结果表明,人参皂甙可以明显抑制脑和肝中过氧化脂质形成,减少大脑皮层和肝中脂褐素的含量,同时也能增加超氧化物歧化酶和过氧化氢酶在血液中的含量,具有抗氧化作用。此外,人参皂甙中的部分单体皂甙如rb1、rb2、rd、rc、re、rg1、rg2、rh1等可不同程度地减少体内自由基含量。人参皂甙可延缓神经细胞衰老并降低老年发生的记忆损伤,且具有稳定膜结构和增加蛋白质合成作用,可以提高老年人记忆力能力