书上说用两种限制酶同时处理粒，检外源DNA其优点可以防止质粒和含同的基因的外源DNA片段自身环化

Question

书上说用两种限制酶同时处理粒，检外源DNA其优点可以防止质粒和含同的基因的外源DNA片段自身环化这什么意思？

Answer 1

每种限制性内切酶的酶切位点是不一样的，
因此，不同的酶切位点不能连到一起，相同的才可以。
用不同的切，到连接的时候，可以有效防止载体自连，只能让外源DNA片段和载体之间那相同的酶切位点相互连接。

Answer 2

如果只用一种内切酶切的话，则片段端口是互补的，会发生自连即环化。