说到最有效率，可以说是把序列发给相应基因合成公司，让公司帮你做了。但前提是你的实验室比较有钱（如果序列长的话），记得上学期分子生物学的老师说，公司是按碱基对的数目收费，做的碱基对越多，价格也就越高。（好像是按多少到多少bp是一个价格档次）。
如何获取目的基因（DNA）。1.反向转录法。以目的基因mRNA为模板，设计上下游的引物，加入原料（dNTP），借助反转录酶，依据碱基互补配对的原则获得cDNA，再用DNA聚合酶合成双链DNA。2.人工合成首先要通过化学合成的方法合成一些寡核苷酸片段，相邻寡核苷酸片段之前包含互补的碱基；然后通过overlap PCR，使寡核苷酸通过互补碱基退火后结合在一起，才能扩增出目的DNA。 这是比较标准的DNA合成方法，一般公司合成大部分DNA序列的原理都是这样。但结构复杂序列庞大的DNA，就要用其它方法合成了。
目前最有效的人工合成（**组装**）DNA的方式是Gibson Assembly。
简单介绍一下这个方法，然后感兴趣的童鞋可以自己去找点干货来读一读。
Gibson Assembly最初是由Daniel Gibson于2009年在J Craig Venter Institute (JCVI)发明的。其实背后的技术原理是很简单的，和overlap pcr十分类似，但是效率更高也更准确。
你可能不知道Daniel Gibson是何方神圣，也可能不知道JVCI是个什么样的机构。但是，作为一个生物相关专业中人，而且还能提出这样的问题，想必一定知道Craig Venter。此君就是那位凭一己之力叫板人类基因组计划的大牛。和人类基因组计划相关的那段奇闻轶事可以自己去搜索一下，蛮有意思的。
想了解Gibson Assembly牛在何处，要先从Craig Venter第二次引起举世关注开始（咦？第一次呢？）。2010年5月末，此君在Science上发了一篇文章，题为：
Creation of a Bacterial Cell Controlled by a Chemically Synthesized Genome
此文一出，可以说引起的举世骚动。当时各大报刊杂志（不仅仅是那些关注技术的）几乎都已同样耸人听闻的标题报道了这件事：Craig Venter创造了人造生命。Economist在Craig的文章发表当天发表了一篇题为“Artificial life, the stuff of dreams and nightmares, has arrived”的文章，这个题目很形象的体现了当时的轰动和争议。
为了避免跑题，拉回到技术本身。这一技术的主旨就是通过设计一系列存在overlap的长引物，然后通过一系列外切酶、链接酶的作用可以最终构建成远超目前PCR技术能够扩增长度的DNA。上面提到的Craig的文章，主要就是通过这一技术体外合成了全基因组DNA，然后将这一基因组转入受体细胞，从而最终得到了由全人工合成DNA操控的人造生命。
