血红蛋白的提取和分离

Question

1 在血红蛋白的提取和分离过程中：粗分离，纯化和纯度鉴定时，都会用到缓冲溶液，其作用是_______
2 在洗脱过程中，对洗脱液的流速要求稳定的目的是______
3 不同的化学物质，其理化性质不同，提取方法也有所差别，如胡萝卜素不溶于水，易溶于_____,因此可以用______方法进行提取

Answer 1

1.确保血红蛋白所处环境的PH值稳定。
2.确保洗脱血红蛋白要充分，一致，即红色带移动均匀一致，且不能出现气泡。
3.有机溶剂 萃取法

Answer 2

1.样品处理：洗涤，用生理盐水洗涤，低速离心，直至上清液中没有黄色
2.血红蛋白释放：加入蒸馏水和甲苯，细胞破碎释放血红蛋白
3.分离：低速离心，分成4层，第三层红色透明液体为血红蛋白水溶液层，分出该层
4.透析：放入透析袋，出去分子量较小的杂质
5.过凝胶色谱柱收集纯蛋白
6.SDS-PAGE检测